Analysis of effects of molecular chaperone and ER stress on HCV replication

当該研究期間において我々は、HCV増殖により誘導されるシャペロン蛋白とHCV増殖との関連性およびHCVの持続感染や炎症、発癌に関して、これらのシャペロン蛋白や小胞体ストレスが病態に与える影響の解析を遂行し、以下の結果を得た。1) シャペロン蛋白の一種であるサイクロフィリンA,B,CをsiRNAにより発現抑制することでレプリコン増殖は有意な抑制効果を認め、これらのサイクロフィリンがHCV増殖に関与していると考えられた。2) 免疫抑制能の弱いサイクロスポリンDも同様のHCVレプリコン増殖抑制効果がみられ、サイクロスポリンの抗ウイルス効果はサイクロフィリンの活性阻害を介することが確認された。3) Two hybrid法を用いてHCV蛋白とサイクロフィリンA,BおよびCの相互作用を確認したが、いずれの組み合わせでもシグナルは検出されず、HCV蛋白とサイクロフィリンの直接会合は認めなかった。4) ヒト肝臓cDNAライブラリーを対象にTwo Hybrid法による網羅的探索を行い宿主蛋白の網羅的スクリーニングを行ったところ、サイクロフィリンと会合する蛋白としてFumarylacetoacetate hydrolase (FAH)、Homo sapiens insulin-like growth factor binding protein2(IGFBP)が同定された。siRNAによる発現抑制によりウイルス増殖を確認したところFAHによりHCVレプリコン増殖が抑制されることを確認した。今後これらの知見を統合し、宿主蛋白を標的とした新たな抗ウイルス分子標的の同定・新規治療開発をめざし臨床応用への基盤を築くことにつながると思われる。

当該研究期間において我々は、HCV増殖により誘導されるシャペロン蛋白とHCV増殖との関連性およびHCVの持続感染や炎症、発癌に関して、これらのシャペロン蛋白や小胞体ストレスが病態に与える影響の解析を遂行し、以下の結果を得た。1) シャペロン蛋白の一種であるサイクロフィリンA,B,CをsiRNAにより発現抑制することでレプリコン増殖は有意な抑制効果を認め、これらのサイクロフィリンがHCV増殖に関与していると考えられた。2) 免疫抑制能の弱いサイクロスポリンDも同様のHCVレプリコン増殖抑制効果がみられ、サイクロスポリンの抗ウイルス効果はサイクロフィリンの活性阻害を介することが確認された。3) Two hybrid法を用いてHCV蛋白とサイクロフィリンA,BおよびCの相互作用を確認したが、いずれの組み合わせでもシグナルは検出されず、HCV蛋白とサイクロフィリンの直接会合は認めなかった。4) ヒト肝臓cDNAライブラリーを対象にTwo Hybrid法による網羅的探索を行い宿主蛋白の網羅的スクリーニングを行ったところ、サイクロフィリンと会合する蛋白としてFumarylacetoacetate hydrolase (FAH)、Homo sapiens insulin-like growth factor binding protein2(IGFBP)が同定された。siRNAによる発現抑制によりウイルス増殖を確認したところFAHによりHCVレプリコン増殖が抑制されることを確認した。今後これらの知見を統合し、宿主蛋白を標的とした新たな抗ウイルス分子標的の同定・新規治療開発をめざし臨床応用への基盤を築くことにつながると思われる。