分子シャペロンの制御を基盤とした植物由来新規がん分子標的治療薬シーズの探索

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本研究では、新規がん分子標的治療薬シーズの探索を目的として、がん細胞の細胞周期に特異的に作用しアポトーシスの誘導をともなった細胞毒性を示す化合物を構造の多様性に富む植物由来天然物から見出し、それら化合物の分子シャペロンの制御との関係を明らかにしていく。本年度は、キンポウゲ科Helleborus nigerから単離された新規ブファジエノリド配糖体のSBC-3ヒト肺小細胞がん細胞に対する細胞毒性とアポトーシス誘導活性を評価した。シスプラチンまたは本化合物で24、48、72時間処理したSBC-3細胞の生存率をMTT法により算出した結果、シスプラチンは濃度および時間依存的に細胞生存率を低下させたのに対し、本化合物は濃度依存的に細胞生存率を低下させた。フローサイトメトリーによる細胞周期解析とannexin V/PI検出によるアポトーシス誘導活性を評価した結果、本化合物で72時間処理したSBC-3細胞は細胞周期をG2/M期で停止しアポトーシスを誘導した。また、ヒノキ科Thujopsis dolabrataから単離された新規ジテルペン配糖体がHL-60ヒト白血病細胞に対してアポトーシスを誘導した。分子シャペロンは、細胞中のシグナル伝達に関与する種々のタンパク分子のフォールディングを助け、細胞の生存に関与する一群のタンパク質である。熱ショックタンパク質として知られるHsp90は代表的な分子シャペロンであり、がん細胞中では高濃度に発現し、がん細胞の生存に寄与することが明らかにされている。植物由来化合物でSBC-3細胞を処理した際のHsp90の発現を評価するための実験条件を検討した。陽性対象であるゲルダナマイシンをSBC-3細胞に接触させ、サンドイッチELISA法によりHsp90の検出を行なったところ、SBC-3細胞の増殖を抑制する濃度においてHsp90の発現が認められた。