加齢黄斑変性症におけるLOC387715の機能に関する研究

LOC387715在年龄相关性黄斑变性中的功能研究

• 批准号: 20791290
• 负责人: 関 麻子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: 独立行政法人国立病院機構(東京医療センター臨床研究センター)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20791290/
• 关键词: 加齢黄斑変性; LOC387715; 加齢黄班変性

○LOC387715の発現検討20年度に引き続きLOC387715遺伝子由来の蛋白質の検出を試みたが、組織由来(サル胎盤、サル眼)、初代培養細胞(ヒトRPE、サルRPE)及び培養細胞(Y79)を用いたレコンビナント発現系のいずれにおいてもウェスタン解析、MS解析法により蛋白質は検出されなかった。また、培養細胞発現系においてプロテアソーム阻害剤(MG132)を添加時すると蛋白質が検出されたことから、細胞内では蛋白質分解系が関与する翻訳後制御を受けていることが示唆された。LOC387715の蛋白質が検出されなかったため、今年度は計画を一部変更し、以下の内容を実施した。○LOC387715翻訳のmiRNAによる制御の検討LOC387715の5'UTRから3'UTRを含む領域をターゲットとするmiRNAをmiRbaseより検索したところ、miR608が同領域に10箇所の結合候補領域を持つことが推測された。培養細胞系を用いたレポータージーンアッセイの結果、細胞内におけるLOC387715配列へのmiR608の結合活性は検出されなかったため、これ以上の検討を中止した。○LOC387715のRNAとしての機能検討LOC387715のmiRNAとしての可能性を探る目的で、同遺伝子領域を含む約10Kbpを探索し、smallRNA領域を推測した。2領域について設計したプローブを用いて、ヒトの種々の臓器における発現を調べた。その結果、1種のプローブで胎盤及び眼特異的なシグナルが検出された。LOC387715のmRNAが主に胎盤と眼でRNAレベルの発現していることと一致する。今後同RNAと眼における機能の関係について調べる。

A. LOC387715 の 発 検 now for 20 year に lead き 続 き LOC387715 heritage 伝 son origin の protein の 検 try out を み た が, tissue origin (サ ル placenta, サ ル eyes), the early generation of cultured cells (ヒ ト RPE, サ ル RPE) and び cultured cells (Y79) を い た レ コ ン ビ ナ ン ト 発 now is の い ず れ に お い て も ウ Youdaoplaceholder0 によ analysis, MS analysis method によ protein 検 検 output されな った った った. ま た, culture cell 発 now に お い て プ ロ テ ア ソ ー ム resistance against tonic (MG132) を add す る と protein が 検 out さ れ た こ と か ら, intracellular で は protein decomposition is が masato and す る turn after 訳 suppression を by け て い る こ と が in stopping さ れ た. LOC387715 <s:1> protein が検 released されな されな ったため ったため, this year 's <s:1> plan を one change <s:1>, the following <s:1> content を implemented た. A. LOC387715 turn 訳 の micrornas に よ る suppression の beg LOC387715 検 の 5 'UTR か ら 3' UTR を containing む field を タ ー ゲ ッ ト と す る micrornas を miRbase よ り 検 cable し た と こ ろ, miR608 が 10 の by combining with field に alternate field を hold つ こ と が speculation さ れ た. Culture cell lines を with い た レ ポ ー タ ー ジ ー ン ア ッ セ イ の results, intracellular に お け る LOC387715 match column へ の miR608 の binding activity は 検 out さ れ な か っ た た め, こ れ above の を 検 please suspend し た. .through LOC387715 の RNA と し て beg LOC387715 の function 検 の micrornas と し て の possibility を agent る purpose で, with heritage 伝 sub-fields を contains about 10 of む KBP を explore し, smallRNA を speculation し た. 2 areas に つ い て design し た プ ロ ー ブ を with い て, ヒ ト の kind 々 の viscera に お け る 発 now を adjustable べ た. Youdaoplaceholder0 そ results, one kind of プロ プロ ブで ブで ブで placenta and び eye-specific なシグナ が検 が検 が検 results された. LOC387715 の mRNA が main に placenta と eye で RNA レ ベ ル の 発 now し て い る こ と と consistent す る. In the future, it will be related to the <s:1> function of RNAと eye における, に と て て regulation べる.

项目成果

日本人における滲出型AMDのゲノムワイド相関解析

日本人湿性 AMD 的全基因组相关性分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 関麻子;(林孝彰);ほか
• 通讯作者: ほか