犬骨髄間質細胞と合成ペプチドAG73を用いた神経再生医療の検討

使用犬骨髓基质细胞和合成肽AG73进行神经再生医学检查

• 批准号: 20880002
• 负责人: 神志那 弘明
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Iwate University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20880002/
• 关键词: 脊髄損傷; 再生医療; 軸索損傷; 犬

本研究申請者は犬脊髄損傷に対する再生医療の取り組みとして、自家移植の可能な犬骨髄間質細胞に着目し、研究を進めている.申請者は犬骨髄間質細胞がラット脊髄後根神経節ニューロンの突起(軸索)を伸長させる作用を持つことを確認し、この作用はフィブロネクチンやラミニンなどの細胞外マトリクス蛋白の産生によるものであることを報告した。本研究では、犬骨髄間質細胞が液性因子を介して神経軸索の伸長を促進するのか、またこのときに最も重要な液性因子は何かを検討した。犬骨髄間質細胞より得られたコンディショニングメディウムはラット神経細胞の軸索を有意に伸長させることを確認した。この犬骨髄間質細胞が有する軸索伸長作用は濃度依存性であり、神経成長因子による作用であることが考えられた。次に得られたコンデイショニングメディウムを5種類の神経成長因子(BDNF, NGF, NT3, NT4/5)に対する中和抗体を用いて前処置を行った。それぞれの中和抗体により前処置したコンディショニングメディウム中でラット神経細胞を培養したところ、NGF中和抗体による処置を行った群のみ軸索伸長高価が有意に抑制された。このことは、犬骨髄間質細胞がもつ液性因子を介した軸索伸長作用は、NGFによるものであることが示唆された。また、平成20年度はラットの脊髄損傷モデル作製の再現性を検証するための予備実験を実施した、ラット脊髄挫傷装置を用いて、ラット脊髄損傷モデルを作製し、後肢運動機能を経時的に評価した。後肢運動機能の損失と回復度合いは、脊髄の損傷程度とほぼ比例し、再現性のあるモデルを作成できることを確認した。

这项研究的重点是可以自体移植作为犬脊髓损伤的再生医学方法的犬骨髓细胞，并正在进行研究。申请人证实犬骨髓基质细胞具有扩展大鼠脊髓中背根神经节神经元的过程（轴突）的作用，并报告说，这种作用是由于产生细胞外基质蛋白（如纤维蛋白蛋白蛋白和层粘连蛋白）所致。在这项研究中，我们研究了狗骨髓基质细胞是否通过体液因子促进神经轴突伸长，以及目前最重要的体液因子是什么。已经证实，从狗骨髓基质细胞获得的调节培养基显着伸长大鼠神经元轴突。狗骨髓基质细胞的轴突延伸效应取决于浓度，被认为是由于神经生长因子所致。然后用中和抗体对五种类型的神经生长因子（BDNF，NGF，NT3，NT4/5）进行中和抗体进行预处理。当大鼠神经元在用每种中和抗体预处理的调节培养基中培养时，仅在用NGF中和抗体处理的组中，高轴突伸长率仅被显着抑制。这表明狗骨髓基质细胞的体液因子介导的轴突延伸作用是由于NGF引起的。此外，在2008年，使用大鼠脊髓挫伤装置制备了大鼠脊髓损伤模型，该模型进行了初步实验，以验证大鼠脊髓损伤模型的可重复性，并随着时间的推移评估了后肢运动功能。我们证实，后肢运动功能的损失和恢复几乎与脊髓损伤程度成正比，并且可以创建可再现模型。