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幹細胞生物学から見た小児外科疾患の病態解明

从干细胞生物学角度阐明小儿外科疾病的病理机制

基本信息

批准号：
20659275
负责人：
小室広昭
金额：
$ 2.05万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

1.小児がんにおけるがん幹細胞の研究については、小児固形腫瘍の細胞株16株を用いて、SP細胞の有無について検討した。細胞株の内訳は神経芽腫7株、横紋筋肉腫4株、ユーイング肉腫5株を用いた。その結果、ユーイング肉腫の1株を除く他の15株で少量ながらSP細胞(0.12-14.6%)が存在することが確認された。Verapamilを添加して、SP分画が消失するかについて検討行ったところ、Verapamilに対する感受性は様々であったが、小児固形腫瘍細胞株の多くでSPのような腫瘍幹細胞が存在する可能性が示唆された。そこでSPとnon-SPのそれぞれの分画を採取し、ヌードマウスの皮下に移植し、発がん性の相違を観察したが、検索した神経芽腫細胞株でSPとnon-SPのいずれも皮下に腫瘍の形成が見られなかった。免疫不全マウスとしてSCIDマウスなどのより腫瘍がつきやすいマウスを用いる必要がおるのかもしれない。2.幹細胞生物学から見た小児外科疾患の治療の可能性について、鎖肛における括約筋の低形成による排便機能障害を改善させる目的で、括約筋の再生による治療の可能性について検討した。ラット筋芽細胞を採取し、培養増幅してラットの下肢の筋欠損部に移植して筋肉の再生が起こるかどうかについて検討した。移植したGFPで標識した筋芽細胞はホストの筋の再生に関与することが確認された。ただし、生着した移植細胞の数はきわめて少なく、今後この効率を高めていくことが課題であると考えられた。さらに、肛門挙筋に移植して括約筋群の再生の可能性について検討したところ、移植細胞は肛門挙筋の周囲で筋管細胞に分化することまでは確認できたものの、筋線維の形成は確認できず、何らかの工夫が必要と考えられた。成長因子の利用などが検討課題と考えられた。

1. Stem cell research: 16 cell lines of small solid tumors, SP cells 7 cell lines were used for neuroblastoma, 4 cell lines for striated fibroblastoma, and 5 cell lines for neuroblastoma. As a result, only 1 strain of SP cells (0.12-14.6%) was identified except for 15 other strains. Verapamil addition, SP separation and disappearance of the cell line, Verapamil response to susceptibility, small solid tumor cell lines, SP separation and the possibility of tumor stem cells exist. The SP and non-SP cells were isolated and transplanted subcutaneously, and the formation of subcutaneous tumors was observed. Immunization is not complete. It is necessary to use SCID. 2. Stem Cell Biology: Potential for Treatment of Pediatric Diseases, Low Formation of Contractile Muscle, Improvement of Defecation Impairment, and Regeneration of Contractile Muscle The regeneration of muscle and muscle in the lower limbs was initiated by the culture of muscle bud cells. Transplantation of GFP identification of tendon bud cells is associated with tendon regeneration. The number of transplanted cells is low, and the rate of transplantation is high. In addition, the possibility of regeneration of anal tendon transplantation and tendon group was examined. The results showed that the transplanted cells differentiated into anal tendon and tendon cells. The utilization of growth factors is an important research topic.