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アグリケーション法を用いた生後の歯胚細胞による歯の再生技術の確立

利用出生后牙胚细胞聚集法建立牙齿再生技术

基本信息

批准号：
20659305
负责人：
本田雅規
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

本課題としたアグリゲーション法を用いることで,担体を用いブタ歯胚細胞を移植した時より,早期に歯の硬組織である,エナメル質と象牙質が再生することが分かった。アグリゲーション法を用いるために回収した細胞群をペレットにすることで,歯胚細胞群の上皮一間葉相互作用が早期に誘導されて,組織形成が促進されることが示唆できる。一方で,われわれが考案した培養法にて培養増殖させたブタエナメル上皮様細胞をブタ歯髄細胞と混合させて移植するとさらにエナメル質が早期に形成することが分かった。上皮細胞を培養することで,アメロゲニンを発現する均一な細胞集団が得られていると考えられた。本課題の達成にはブタ細胞を用いることとしていたが,臨床応用を見据えるとヒト細胞の解析が有効である。そこで,昨年,ヒト細胞の入手を可能し,今年度は,ヒト歯髄組織から間葉系幹細胞を得るために幹細胞マーカーを用いてFACSにて単離した。この研究から,乳歯歯髄には未分化性を維持するための因子と考えられるNGFR(CD271)を発現する細胞が存在することが分かった。このNGFRの発現は永久歯の歯髄細胞には認められなかった。一方で,すでに間葉系の幹細胞のマーカーとして知られている,CD10,CD44,CD73,CD90は両細胞において発現していた。そこで,NGFRの陽性細胞と陰性細胞を単離して比較すると,細胞増殖能はNGFR陽性細胞が高く,多分化能の解分では,NGFR陰性細胞の多分化能が高いことが分かった。これらの結果からNGFRは,間葉系幹細胞として考えられている歯髄幹細胞の増殖と分化に強く関与していることが考えられた。しかしながら,なぜに,永久歯歯髄細胞では,このNGFRが発現していないのかは明らかではない。

This paper discusses the application of the method of embryo transplantation in the early stage of dentin regeneration. The epithelial and mesenchymal interactions of embryonic cell populations are induced early and tissue formation is promoted. In one way, the culture method is used to culture and propagate epithelial cells, to mix and transplant epithelial cells, and to form early epithelial cells. Epithelial cells were cultured in vitro. The goal of this project is to achieve the goal of clinical application. This year, stem cells were first introduced, and this year, stem cells were introduced into the tissue culture system. The study showed that the expression of NGFR(CD271) in breast cancer cells was significantly higher than that in normal breast cancer cells. The NGFR's development is permanent and the tooth cells are recognized. In one case, stem cells of mesenchymal lineage were found in CD10, CD44, CD73, CD90 cells. In addition, NGFR-positive cells and NGFR-negative cells were separated and compared. The cell proliferation ability was higher than that of NGFR-positive cells and the differentiation ability of NGFR-negative cells was higher than that of NGFR-positive cells. The result is that mesenchymal stem cells grow and differentiate. The NGFR is present in the permanent dentition cells.