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歯胚サイドポピュレーション細胞(エスビー細胞)による歯の再生技術の確立

利用牙胚侧群细胞（SB细胞）建立牙齿再生技术

基本信息

批准号：
18659592
负责人：
本田雅規
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は歯胚組織から単離したSP細胞が歯の組織再生に有用であることを検討したが、残念ながら、SP細胞とMP細胞において有意な差は得られなかった。はじめに、歯胚組織から単離したSP細胞群とメインポピュレーション細胞群(MP細胞)をin vitro(Int, End. Journal2007)およびin vivoにおいて比較・解析した。in vitroにおける実験は、SP細胞群とMP細胞群をFACSにてソーティングした後に歯胚上皮細胞と共培養しALP活性の比較・解析を行ったが、有意差は得られなかった。歯関連遺伝子群に関してもRT-PCR法を用いて比較解析を行ったが、著名な差は得られなかった。次に、in vivoの移植実験による歯の再生能の評価をおこなった。ソーティングしたSP細胞とMP細胞を培養して増殖させた後に、歯胚上皮細胞と担体の中で再度組み合わせた。これらのSP細胞とMP細胞を組み合わせた担体を、ヌードラットの腹部大網に移植した。再生組織の評価は、過去の研究結果において、培養歯胚上皮細胞との組むあわせ移植により、移植4週後にエナメル質が再生することから(Cell transplantation 2007)、移植4週後に再生組織を取り出し、組織化学的および免疫組織化学的に評価することを予定レた。しかし、移植後取り出した移植体は1-2mmと小さく、かっ、肉眼的に硬組織形成が認められなかった。また、組織学的に観察したが、硬組織形成は確認できなかった。そこで、培養したSP細胞とMP細胞群をさらに、SP細胞とMP細胞にソーティングで分けることを試みたが、培養・継代するとSP細胞の存在が確認できなかった。したがって、SP細胞は単離した歯髄組織内には存在するものの、継代培養すると、その形質を喪失することが示唆された。さらに、移植にはある程度の細胞数が必要であり、歯髄組織内に移植必要SP細胞が存在しないことから、今回の実験においてSP細胞の歯の形成能を評価することは困難であった。

This year, the embryonic tissue is separated from SP cells, and the tissue regeneration is useful. SP cell population and MP cell population are in vitro(Int, End). Journal2007) Comparison and analysis in vivo. Comparison of ALP activity between SP and MP cell populations in vitro and in vitro The RT-PCR method was used to compare and analyze the relationship between the two groups. Evaluation of the regeneration ability of teeth in vivo transplantation After the SP cells and MP cells were cultured and proliferated, the dental embryonic epithelial cells and the support were reintegrated. The SP cells and MP cells were combined to form a large network of cells. Evaluation of regeneration tissue, previous studies, tissue culture of embryonic epithelial cells, transplantation, tissue regeneration 4 weeks after transplantation (Cell transplantation 2007), regeneration tissue extraction 4 weeks after transplantation, histochemical and immunohistochemical evaluation. Graft removal after transplantation is 1-2mm small, hard tissue formation is recognized by naked eye Histological observation, hard tissue formation is confirmed. The SP cells and MP cells were cultured and the existence of SP cells was confirmed. In addition, SP cells are isolated from the tissue and are characterized by the presence and absence of DNA. The number of cells necessary for transplantation is difficult to evaluate, and SP cells necessary for transplantation exist in tissue.