遺伝子導入による歯周組織オルガノイドティシュエンジニアリング

通过基因转移进行牙周组织类器官组织工程

• 批准号: 20659326
• 负责人: 北村 正博
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20659326/
• 关键词: 遺伝子導入; 歯周組織; オルガノイド; 歯周組織再生

本年度は、前年度に確立した遺伝子導入法を用いて歯根膜細胞へ菌周組織再生関連遺伝子を導入し、導入遺伝子の発現確認をRT-PCR法を用いて行うと共にそのタンパクレベルでの分泌をウエスタンブロット法にて検出した。すなわち、セルライン化されたヒト歯根膜細胞よりPeriostinのアイソフォームTYPE IIおよびPLAP-1の全長cDNAを単離し、発現cDNA用ベクターp3XFLAG-CMV-14にクローニングすることにより各導入遺伝子を準備し、エレクトロポレーション法を用いて各遺伝子をマウス歯根膜細胞株であるMPDL22に導入し、導入遺伝子とそのタンパクレベルでの発現を前記の方法で検出した。その結果、遺伝子導入MPDL22における導入遺伝子のmRNAレベルでの発現とそのタンパクレベルでの分泌が確認できた。また、歯周組織再生を誘導する有力な幹細胞リソースに成り得る脂肪組織由来幹細胞(ADSC)の足場材として歯周組織再生の空間確保に有効と考えられるβ-TCPブロックへの播種法を検討した。その結果、β-TCPブロックとADSCを陰圧付加下で共培養することにより、ADSCがβ-TCPブロックに定着し長期間生存することが明らかになった。そして、そのADSC播種β-TCPブロックをビーグル犬人工的2壁あるいは1壁性歯周組織欠損モデルに移植し観察した結果、ADSC播種β-TCPブロックは歯周組織欠損部に定着し良好な治癒が得られることが確認された。以上の結果より、本研究により確立された歯根膜細胞への遺伝子導入法とADSCをはじめとする幹細胞およびβ-TCPなどの足場材を組み合わせることにより、歯周組織再生に有効な歯周組織オルガノイドの形成の可能性が示唆された。

This year and the previous year, make sure that you can use the tissue around the cell of the root membrane to regenerate the tissue of the cell, and then use the RT-PCR method to confirm that you can use the method to make sure that you can make sure that you can use this method to make sure that you can make sure that you can use this method to make sure that you do not know how to do so. The whole length of cDNA is isolated from the Periostin cell of the root membrane, the whole cDNA of the PLAP-1 is isolated, and the cDNA is used to prepare the data of each sub-cell, the MPDL22 of each sub-cell of the root membrane of each sub-cell, the MPDL22 of each cell of the root membrane. The import child is not valid. The previous method is not available. The results show that you can make sure that your child is in the MPDL22 environment and that you are sure to make sure that you do not know how to do it. The results show that your son has been loaded into the mRNA file. The source of fat tissue (ADSC) is the source of fat tissue regeneration (ADSC). The space of tissue regeneration is guaranteed to be tested. β-cell cycle is used to make sure that there is no significant change in the tissue regeneration space. The results show that β-TCP is responsible for long-term survival, while β-TCP is responsible for long-term survival. After sowing β-TCP in dogs and ADSC, the results of tissue transplantation were observed in 2-walled dogs, and the results of tissue transplantation were observed in ADSC. The results of tissue failure were confirmed by the results of tissue transplantation. According to the results of the above results, in this study, we established that the root membrane cytoskeleton was inserted into the root membrane cell. The cell cycle of ADSC, β-TCP, and tissue regeneration showed that there was a significant difference in the possibility of tissue regeneration.

项目成果

Periodontal ligament-specific periostin positively regulates mineralization of periodontal ligament cells

牙周膜特异性骨膜素正向调节牙周膜细胞的矿化

• 发表时间: 2009
• 作者: Yamada S;Tauchi T;Fujihara C;Kajikawa T;Ozawa Y;Kitamura M;Murakami S
• 通讯作者: Murakami S

歯根膜特異的Periostinアイソフォームは歯根膜細胞の硬組織形成分化を促進する

牙周膜特异性Periostin亚型促进牙周膜细胞硬组织形成分化

• 发表时间: 2008
• 作者: 水戸祐子;服部佳功;渡邉誠;林田 浩一;田内拓史
• 通讯作者: 田内拓史