Development of single-molecule tracking using fluorescent silicon nanoparticles and its application to signaling mechanisms in clathrin-coated pits

使用荧光硅纳米粒子开发单分子追踪及其在网格蛋白包被小坑信号传导机制中的应用

• 批准号: 21570167
• 负责人: FUJIWARA Takahiro
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21570167/
• 关键词: 1分子追跡; 蛍光プローブ; 細胞膜; 受容体; クラスリン被覆ピット; シグナル伝達

Single receptor molecules in the plasma membrane were specifically labeled with fluorescent silicon nanoparticles without blinking or photobleaching, making it possible for the first time to visualize individual internalization events through clathrin-coated pits. A method for conjugating ligands for enzyme-based protein tag to nanoparticle surface was developed, so that the versatility of the probe was enhanced. A new camera system was further developed, allowing us to detect each elementary process of receptor association and signaling complex formation at a 0. 1-ms resolution.

细胞膜上的单个受体分子被荧光硅纳米颗粒特异性标记，没有眨眼或光漂白，这使得首次有可能通过笼罩蛋白包裹的凹坑来可视化个体的内化事件。建立了一种将酶标记物的配体偶联到纳米颗粒表面的方法，从而提高了探针的通用性。一种新的摄像系统被进一步开发，使我们能够在0。1毫秒分辨率。

项目成果

トランスポートソームの組織化における細胞骨格系の役割「トランスポートソームの世界-膜輸送研究の源流から未来へ-」

细胞骨架系统在运输体组织中的作用“运输体的世界 - 从膜运输研究的起源到未来”

• 发表时间: 2011
• 作者: 木下専;藤原敬宏
• 通讯作者: 藤原敬宏

Archipelago architecture of the focal adhesion: Membrane molecules freely enter and exit from the focal adhesion zone

• DOI: 10.1002/cm.21032
• 发表时间: 2012-06
• 期刊: Cytoskeleton
• 影响因子: 2.9
• 作者: Akihiro C E Shibata;T. Fujiwara;Limin H Chen;Kenichi G. N. Suzuki;Yoshiro Ishikawa;Yuri L. Nemoto;Y. Miwa;Z. Kalay;R. Chadda;K. Naruse;A. Kusumi

Confining domains lead to reaction bursts: reaction kinetics in the plasma membrane.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0032948
• 发表时间: 2012
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Kalay Z;Fujiwara TK;Kusumi A
• 通讯作者: Kusumi A

Compartmentalization of the plasma membrane by actin-based membrane skeleton as revealed by high-speed single fluorescent-molecule tracking

高速单荧光分子追踪揭示了基于肌动蛋白的膜骨架对质膜的区室化

• 发表时间: 2009
• 作者: T. Fujiwara;S. Takeuchi;Y. Nagai;K. Hanaka;K. Iwasawa;K. Suzuki;and A. Kusumi
• 通讯作者: and A. Kusumi

トランスポートソームの組織化における細胞骨格系の役割(トランスポートソームの世界-膜輸送研究の源流から未来へ-)

细胞骨架系统在运输体组织中的作用（运输体的世界 - 从膜运输研究的起源到未来）

• 发表时间: 2011
• 作者: 木下専;藤原敬宏
• 通讯作者: 藤原敬宏