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正常成体脳におけるFRS2分子発現と脳腫瘍形成時の動態変化・作用機序の解明

阐明正常成人大脑中FRS2分子的表达、脑肿瘤形成过程中的动态变化和作用机制

基本信息

批准号：
09J03420
负责人：
峯岸ゆり子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J03420/
关键词：
FRS2beta シグナル伝達プロテオミクス細胞内分解神経細胞

项目摘要

受容体型チロシンキナーゼであるFGF受容体の基質タンパクで、アダプター分子であるFRS2ファミリーにはFRS2alphaとFRS2betaが存在する。FRS2alphaがFGFシグナル伝達の中心的役割を担っている一方で、FRS2betaに特異的なシグナル伝達、独自の生理学的機序に関してはいまだ多くが未解明である。我々は、すでにFRS2βが神経細胞内において小胞状に発現し、一部がリソソームと共局在すること(FEBS Lett., 583 : 807-814, 2009)、またFRS2βはEGF受容体ファミリーと結合性を持ち、EGFシグナルに対して抑制的な作用を持つこと(Oncogene, 29 : 3087-3099, 2010)などについて報告してきたが、本年度はFRS2βのさらなる機能解析のため、FRS2βに特異的な結合分子をLC-MS/MS Proteomics解析により同定を行い、新規に得られた結合候補分子の中からE3ユビキチンリガーゼであるCBLと結合性を持ち、細胞内輸送に関与することで知られているCIN85/CD2APファミリー分子に着目し、神経細胞内で内在性に発現しているFRS2betaとの相互作用について、さらなる検討を行った。CIN85/CD2APとFRS2βとの相互作用と、EGFシグナル抑制効果との関連について、種々の培養細胞、初代培養神経細胞と、分子生物学・生化学的検討、蛍光標識したタンパクの細胞内分子イメージング、ターゲットタンパクのSiRNAによるノックダウン、および細胞内分解阻害剤を用いて検討を行った結果、FRS2beta-CIN85/CD2AP-CBL複合体はリソソームでのEGF受容体ファミリーの1つである、ErbB2受容体のタンパク分解を促進することが確認され、受容体のタンパク量の減少によりErbBシグナルを抑制的に制御していることが明らかとなった。また初代培養神経細胞におけるFRS2betaのノックダウンの実験から、FRS2betaがErbB2のタンパク量を減少させる機能は、生理的には神経発生と関連しており、神経細胞の分化成熟に支持的に寄与している可能性が示唆された。

FRS 2 alpha and FRS 2 beta are present in the receptor matrix. FRS2alpha and FRS2beta are related to the physiological mechanisms of FRS 2alpha and FRS2beta. FRS2β is a small cellular protein that occurs in neurons, and FRS 2 β is a small cellular protein that occurs in neurons. 583 :807-814, 2009), FRS2β, EGF receptor, binding, binding,(Oncogene, 29 :3087-3099, 2010) FRS 2β-specific binding molecules were analyzed by LC-MS/MS Proteomics, and new binding candidates were obtained. Intracellular transport is related to the interaction between CIN85/CD2AP and FRS2beta, which is intrinsic to the intracellular development of neurons. The interaction between CIN85/CD2AP and FRS2β, EGF receptor inhibitory effects and correlation, seed culture cells, primary cultured neurocytes, molecular biology and biochemistry, light labeling, intracellular molecular interaction, intracellular siRNA interaction, and intracellular breakdown inhibitors. FRS2beta-CIN85/CD2AP-CBL complex is responsible for the identification and inhibition of EGF receptor degradation and ErbB receptor degradation. The possibility of functional, physiological, and neurodevelopmental support for FRS2beta and ErbB2 in primary cultured neurons was also discussed.