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開口分泌関連分子間相互作用の時空間的解析

胞吐作用相关分子相互作用的时空分析

基本信息

批准号：
09J05740
负责人：
高橋寛英
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

初年度に引き続き、神経細胞における開口分泌の引き金と考えられているタンパク質、シナプトタグミンと再構成膜間の結合力を原子間力顕微鏡の1分子力学測定によって測定した。結果として、シナプトタグミンがカルシウム存在下で再構成膜と強固に結合すること、また、カルシウム非存在下においても、再構成膜と結合することが示唆された。これらの結果から、神経細胞のカルシウムイオン濃度が低い場合でもシナプトタグミンは神経前細胞の細胞膜と弱く結合し、開口分泌の引き金となる、カルシウムイオン濃度依存的な強い結合に備えているという生理的モデルを示すことができた。この結果は、Biophysical Journalに筆頭著者の原著論文として掲載された。続いて、開口分泌において膜融合を引き起こすSNAREタンパク質とシナプトタグミンとの相互作用の解析を行った。シナプトタグミンを結合させた原子間力顕微鏡探針を用いて、標的膜上に再構成したt-SNAREs分子との結合部位を認識イメージングによって解析した。結果、シナプトタグミンは再構成膜だけでなく、再構成膜上のt-SNAREs分子とも1分子レベルで結合することが分かった。この結果は、シナプトタグミンが単に神経細胞の細胞膜のみと結合するだけではなく、t-SNAREとも特異的に結合することを示しており、シナプトタグミンがt-SNAREs・神経細胞の細胞膜と複合的に結合することによって引き起こされる膜融合促進機構を示すものである。これらの結果をもとにして現在、本研究員が筆頭著者の原著論文を執筆中である。

In the early years, the molecular mechanics measurement of the binding force between atomic forces and microscopes was carried out. The results showed that the recombination membrane was strongly bound in the presence of the ligand, and the recombination membrane was strongly bound in the absence of the ligand As a result, when the concentration of the neuron is low, the cell membrane of the neuron is weakly bound, and the opening of the secretion is strongly bound, and the concentration of the neuron is strongly bound, and the physiological membrane is strongly bound. The results were published in Biophysical Journal. The analysis of the interaction between SNARE and the membrane fusion in the open secretion The binding sites of t-SNAREs molecules on the target membrane were identified and analyzed. As a result, t-SNAREs molecules on the reconstituted membrane are bound to each other. The results showed that the membrane fusion promoter of t-SNARE and t-SNARE could promote the membrane fusion of t-SNAREs. The author of the paper is currently writing.