DNA結合性小分子を利用した遺伝子の精密分析法の開発

开发利用DNA结合小分子的精确基因分析方法

• 批准号: 09J09841
• 负责人: 渡邉 貞佳
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Kyushu Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J09841/
• 关键词: フェロセン; β-シクロデキストリン; ナフタレンジイミド; 包接挙動; 均一溶液検出; 電気化学的検出; 新たな還元電流値; 「電流値増加」型; インターカレーター; 電気化学; 相互作用解析; Scatchard解析

ヒトゲノムプロジェクトの成果によって病気に関連する遺伝子の知見が得られてきた。これを利用することにより遺伝子レベルでの診断が可能となってきた。これまで種々の遺伝子検出法の開発が行われているが、この中でDNAプロープ固定化電極を用いた電気化学を利用した方法は、迅速且つ簡便のみならず、低コストや装置の小型化の可能性から注目されている。この手法を固定化操作が不要な系へ発展することができれば、更に簡便な検出法を実現できる期待される。しかし、均一系での電気化学測定では、DNAプローブが結合したターゲット遺伝子が存在すると電流が減少する「電流値減少」型であった。そこで、本研究では、固定化操作なしで「電流値増加」型の電気化学的検出を実現する手法を開発することを試みた。このために均一溶液中で二本鎖DNAへの結合によって電気化学的シグナルが変化するDNAリガンドの開発を試みた。最終的に同一分子内にβ-シクロデキストリン(β-CD)とフェロセン(Fc)を導入した新規ナフタレンジイミド(FNC)を開発することによってこれを実現できた。FNCは、水溶液中分子内でFcがβ-CDに包接され、二本鎖DNAにインターカレートされることでFcが放出された。これによって、均一溶液中で「電流値増加」型の遺伝子検出法が確立できた。平成21年度に報告したFNC誘導体は水溶液中では、包接していなかったが、当該年度では、リンカー長を短くしたFNC誘導体を新たに開発することによって水溶液中ではFcがβ-CDに分子内包接することが円偏光二色性スペクトルや電気化学測定に検討によって明らかとなった。DNA存在下での新規FNC溶液中での電気化学測定では、低電位において新たに還元ピークが見られ、これを利用することによってDNAプローブが結合したターゲットDNAの定量的な評価を「電流値増加」型で実現できた。

I was told that I was sick and that I was informed that I was sick. It is possible that the child may be cut off by taking advantage of the situation. A variety of methods have been developed for the use of DNA electrodes for immobilization of electrodes, rapid and convenient treatment, and the possibility of miniaturization of low-temperature equipment. The immobilization operation of the immobilization method does not need to be performed in the exhibition. There is a low-current low-voltage, low-current, low-current, low- In this study, the experiment, the immobilization operation and the "current boost" electrochemistry were used to realize the operation of the electrochemistry test. The chemical reaction of DNA in ordinary universities in homogeneous solution combined with the chemical reaction of chemical engineering in ordinary colleges and universities. The chemical reaction of ordinary universities and ordinary universities in the homogeneous solution was carried out by means of DNA chemical examination. The most important in the same molecule is β-CD (β-DNA) in the same molecule (Fc) in the same molecule. In the new regulation (FNC), there is a significant difference between the two. FNC, intramolecular "Fc" β-CD "encapsulated" in aqueous solution, and ordinary universities "DNA" and "Fc" released from ordinary universities. It is necessary to determine the temperature by the method of "current surge" in homogeneous solution. In Pingcheng's 21 annual report, there is a high concentration of carbon dioxide in the aqueous solution of FNC. In this year's annual report, there is a significant increase in the content of Fc β-CD in aqueous solution. This year, there is a significant increase in the concentration of Fc β-CD in the aqueous solution. In the presence of DNA, the electrochemical determination of electricity in the solution of conventional FNC, the determination of current current in the solution of low electric potential, the determination of current current in the solution of conventional DNA, and the detection of electrical current in the solution of conventional DNA are realized by the combination of the chemical determination of electrical current in the solution of conventional DNA.

项目成果

Electrochemical detection of a DNA duplex using new ferrocenylnaphthalene diimide in homogenous solution

使用新型二茂铁萘二酰亚胺在均质溶液中电化学检测 DNA 双链体

• 发表时间: 2010
• 作者: Emi Tamaki;Takashi Miyaki;Jun Rekimoto;Atsutoshi Ikeda;Katsuhiro Shiono;Sadayoshi Watanabe
• 通讯作者: Sadayoshi Watanabe

2, 2-dipicolylamine (Dpa)-亜鉛錯体を有するナフタレンジイミドによるDNAのリン酸残基の検出

使用萘二酰亚胺和 2,2-二吡啶胺 (Dpa)-锌复合物检测 DNA 中的磷酸盐残基

• 发表时间: 2010
• 作者: Emi Tamaki;Takashi Miyaki;Jun Rekimoto;Atsutoshi Ikeda;Emi Tamaki;渡邉貞佳
• 通讯作者: 渡邉貞佳

DNAのリン酸部位を識別するナフタレンジイミド誘導体の設計とDNAとの相互作用解析

识别DNA磷酸位点的萘二酰亚胺衍生物的设计及其与DNA的相互作用分析

• 发表时间: 2010
• 作者: 玉城絵美;味八木崇;暦本純一;栗田雄一;渡邉貞佳
• 通讯作者: 渡邉貞佳

Discrimination of phosphorylated double stranded DNA by naphthalene diimide having zinc (II) dipicolylamine complexes

具有锌 (II) 二吡啶胺复合物的萘二酰亚胺对磷酸化双链 DNA 的区分

• 发表时间: 2011
• 期刊: Bioorganic Medicinal & Chemistry
• 作者: Yuya Ishii;Heisuke Sakai;Hideyuki Murata;中野さやか;Katsuhiro Shiono;中野さやか;Imene Rajhi;中野さやか;Hirokazu Takahashi;中野さやか;Hirokazu Takahashi;Sadayoshi Watanabe
• 通讯作者: Sadayoshi Watanabe

均一溶液中での新規フェロセン化ナフタレンジイミドによる電気化学二本鎖DNA検出の試み

尝试在均相溶液中使用新型二茂铁萘二酰亚胺进行电化学双链 DNA 检测

• 发表时间: 2010
• 作者: 玉城絵美;味八木崇;暦本純一;Katsuhiro Shiono;渡邉貞佳
• 通讯作者: 渡邉貞佳