胆汁形成におけるMDR3/ABCB4と新規共役因子RACK1の相互作用の解析

胆汁鯵滞様の症状を呈する際には、ABCB4を始めABCB11やABCC2などのABC蛋白質の細胞膜表面上の発現量が低下し、胆汁流の形成が破綻することが示唆されている。胆管結紮や大腸菌内毒素(リポポリサッカライド:LPS)投与により類似の動物モデルが構築されることが知られているため、これらの病態モデル動物におけるRACK1の発現量変動、またそれに伴う各ABC蛋白質の発現量・機能制御を検証した。マウスにLPSを腹腔内投与したところ、過去に報告のあるようにAbcb4/Abcb11/Abcc2の蛋白質発現量は低下し、またRack1の発現量は60%程度まで低下した。続いて、この胆汁欝滞モデルマウスにアデノウィルスを用いてRack1を一過性に過剰発現させ、それによりABC蛋白質の発現量が回復するか否か確認したものの、有意な効果は認められなかった。一方で、Rack1に対するshRNA配列を組み込んだアデノウィルスを投与することで肝臓選択的にRack1の遺伝子抑制を行ったマウスにおいては、Abcb4と共にAbcc2、Abcg5/g8の膜分画での蛋白質発現量が低下した。さらに、回収した胆汁中の組成を解析した結果、Abcc2の生理的基質であるグルタチオンの濃度がコントロール条件の70%程度まで低下していること、Abcg5/g8の生理的基質のコレステロール量が60%程度に低下していることが明らかになった。これらABC蛋白質に関しては、in vitroでの検討から、ABCB4やABCG2と同様にその蛋白質発現量及び細胞内局在がRACK1の発現量によって制御されることが示唆された。しかしながら、それらが選択性を持ってどのように相互作用しているのか、また生理的条件下あるいは病態時にこれらがどのように寄与しているのかに関しては明確な知見は得られなかった。今後さらなる解析を行うことで、RACK1のマスター制御因子としての可能性を明らかにするものと期待される。

胆汁鯵滞様の症状を呈する際には、ABCB4を始めABCB11やABCC2などのABC蛋白質の細胞膜表面上の発現量が低下し、胆汁流の形成が破綻することが示唆されている。胆管結紮や大腸菌内毒素(リポポリサッカライド:LPS)投与により類似の動物モデルが構築されることが知られているため、これらの病態モデル動物におけるRACK1の発現量変動、またそれに伴う各ABC蛋白質の発現量・機能制御を検証した。マウスにLPSを腹腔内投与したところ、過去に報告のあるようにAbcb4/Abcb11/Abcc2の蛋白質発現量は低下し、またRack1の発現量は60%程度まで低下した。続いて、この胆汁欝滞モデルマウスにアデノウィルスを用いてRack1を一過性に過剰発現させ、それによりABC蛋白質の発現量が回復するか否か確認したものの、有意な効果は認められなかった。一方で、Rack1に対するshRNA配列を組み込んだアデノウィルスを投与することで肝臓選択的にRack1の遺伝子抑制を行ったマウスにおいては、Abcb4と共にAbcc2、Abcg5/g8の膜分画での蛋白質発現量が低下した。さらに、回収した胆汁中の組成を解析した結果、Abcc2の生理的基質であるグルタチオンの濃度がコントロール条件の70%程度まで低下していること、Abcg5/g8の生理的基質のコレステロール量が60%程度に低下していることが明らかになった。これらABC蛋白質に関しては、in vitroでの検討から、ABCB4やABCG2と同様にその蛋白質発現量及び細胞内局在がRACK1の発現量によって制御されることが示唆された。しかしながら、それらが選択性を持ってどのように相互作用しているのか、また生理的条件下あるいは病態時にこれらがどのように寄与しているのかに関しては明確な知見は得られなかった。今後さらなる解析を行うことで、RACK1のマスター制御因子としての可能性を明らかにするものと期待される。