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新規アナプラズマ病原体の特異的診断法開発、および疫学性状と家畜への病原性解明

开发新型无形体病原体的特异性诊断方法并阐明其流行病学特征和对牲畜的致病性

基本信息

批准号：
21380192
负责人：
猪熊壽
金额：
$ 8.57万
依托单位：
Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

国内で検出されたAnaplasma phagocytophilumおよびAnaplasma bovisの分子生物学的位置付けを明らかにする目的で、それぞれの種の16S rRNA遺伝子に加え、クエン酸合成酵素遺伝子(glt A)および熱ショック蛋白遺伝子(groEL)の完全配列を決定し、既知種の遺伝子配列と比較検討した。その結果、我が国のA.phagocytophilum の16s rRNA、glt A およびgroEL の遺伝子配列は、欧米で分離されている種の遺伝子配列とは著しく相同性が低く、近縁ではあるが別種である可能性が考えられた。なお、日本の動物から検出されたA.bovis の遺伝子配列は、既知種と一致した。また、遺伝子解析結果に基づきそれぞれの種に特異的なPCR法を開発し、北海道の馬およびマダニについてその感染状況を検査した。北海道日高地域に放牧される競走馬87頭について、A.phagocytophilumおよびA.bovis の感染状況を調査したが、陽性は検出されなかった。ただし3頭の馬に寄生していたマダニ10個体を検索したところ、1個体からA.phagocytophilum遺伝子断片が、また4個体からA.bovis遺伝子断片が検出され、日本の放牧馬がこれら病原体に暴露されている可能性が示唆された。また、北海道十勝地方の山林におけるマダニを検査したところ、シュルツェマダニの17.5%(17/97)およびヤマトマダニの1.2%(1/82)からA.phagocytophilum遺伝子断片が検出され、これらのマダニがベクターである可能性が示唆された。

The molecular biological position of Anaplasma phagocytophilum and Anaplasma bovis isolated in China was investigated for the purpose of determining the complete alignment of 16S rRNA gene, acid synthase gene (glt A) and protein gene (groEL) in all species. The results showed that the 16s rRNA, glt A and groEL of A.phagocytophilum were different from those of A. phagocytophilum. A.bovis and B.bovis are the same species. The results of gene analysis were based on the development of a species-specific PCR method and the detection of infection in Hokkaido. The infection status of A.phagocytophilum and A.bovis was investigated in Hokkaido, Japan. 10 individuals were detected, 1 A.phagocytophilum gene fragment was detected, 4 A.bovis gene fragments were detected, and the possibility of exposure to this pathogen was demonstrated in Japanese grazing horses. 17.5%(17/97) of A.phagocytophilum gene fragments were detected, and the probability of A.phagocytophilum gene fragments was shown.