Elucidation of onset mechanism of bovine leukemia and development of an early diagnosis method based on lymphocyte clonality analysis

阐明牛白血病的发病机制并开发基于淋巴细胞克隆分析的早期诊断方法

• 批准号: 20H03142
• 负责人: 猪熊 壽
• 金额: $ 10.65万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20H03142/
• 关键词: 牛伝染性リンパ腫; クローナリティ解析; リンパ球増多症; 発症マーカー; 発症機序; 牛伝染性リンパ腫（牛白血病）; クローナリティー解析; 早期診断; ウイルス発がん; 牛白血病; クローナリティ―解析

牛伝染性リンパ腫（旧名：牛白血病）診断におけるBリンパ球のクローナリティ検査法の感度向上を目的としてIGLλ遺伝子クローナリティPCRを開発した。IGLλ遺伝子クローナリティPCRの感度と特異度は、それぞれ64.6%と95.7%であった。この方法と既存のIGH遺伝子クローナリティPCRを併用することにより、牛Bリンパ球のクローナリティ検査法の感度は77. 8%まで向上した。次にBリンパ球のクローナリティ検査法を複数の牛伝染性リンパ腫発症例に応用したところ、末梢血塗抹観察では判断があいまいであった症例の腫瘍確定診断が容易になるとともに、体表リンパ節腫大やリンパ球増多症のみられない非典型的な牛伝染性リンパ腫を診断することが可能となった。また、末梢血に腫瘍細胞が出現していない症例であっても体内の腫瘍組織を材料とすることで牛伝染性リンパ腫の診断が可能となることが示された。さらに、クローナリティ異常を呈したが発症していない個体の経時的観察を行ったところ、発症前に増殖していたリンパ球クローンとは全く別のクローンが突然腫瘍化することを発見し、発症機序に関してこれまでの考え方を修正する必要が生じた。牛伝染性リンパ腫発症機序の解明を目的として、各症例のDNAメチル化の異常に関与するヒストン修飾状況を調べたところ、牛伝染性リンパ腫ウイルス感染から持続性リンパ球増多症へ、さらに牛伝染性リンパ腫発症への病態進行には、それぞれ発がん抑制遺伝子の不活性化および細胞分裂の活性化を引き起こすヒストン修飾異常が関与している可能性が示唆された。

Cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen (old name: bovine leukemia) diagnosis に お け る B リ ン パ ball の ク ロ ー ナ リ テ ィ 検 check method の sensitivity up を purpose と し て IGL lambda heritage 伝 son ク ロ ー ナ リ テ ィ PCR を open 発 し た. IGLλ remains 伝 offspring ロ ロ ナリティ ナリティPCR degree sensitivity と specificity それぞれ それぞれ64.6%と95.7%であった. こ の way と existing の IGH posthumous son 伝 ク ロ ー ナ リ テ ィ PCR を and す る こ と に よ り, cattle B リ ン パ ball の ク ロ ー ナ リ テ ィ 検 check method の sensitivity は 77. 8% ま で upward し た. Time に B リ ン パ ball の ク ロ ー ナ リ テ ィ 検 check method を plural の cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen 発 cases に 応 with し た と こ ろ, peripheral blood smear 観 examine で は judgment が あ い ま い で あ っ た cases の swollen sores definite diagnosis が easy に な る と と も に, surface リ ン パ section enlargement や リ ン パ ball raised many disease の み ら れ な い atypical な cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen を diagnosis Youdaoplaceholder0 となった とが may be となった. ま た に swollen sores, peripheral blood cells appear が し て い な い cases で あ っ て も の swollen sores in vivo tissue を と す る こ と で cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen の diagnosis can と が な る こ と が shown さ れ た. さ ら に, ク ロ ー ナ リ テ ィ abnormal を show し た が 発 disease し て い な い individual の 経 観 examine を line when っ た と こ ろ, 発 に raised before colonization し て い た リ ン パ ball ク ロ ー ン と は く all don't の ク ロ ー ン が suddenly swollen sores change す る こ と を 発 see し, 発 machine sequence に masato し て こ れ ま で の exam え party を correction す る が necessary raw じ た. Cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen 発 disease machine sequence の interpret を purpose と し て, all cases の DNA メ チ ル change の abnormal に masato and す る ヒ ス ト ン modification condition を adjustable べ た と こ ろ, cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen ウ イ ル ス infection か ら hold 続 sex リ ン パ ball raised more disease へ, さ ら に cattle 伝 dyeing リ ン パ swollen 発 disease へ の pathological for に は, そ れ ぞ れ 発 が ん inhibit 伝 son の Inactivation および cell division <s:1> activation を leads to すヒスト abnormal <s:1> modification が and the possibility of <s:1> て る る る る が is が suggesting された.

项目成果

後躯麻痺を呈した黒毛和種種雄牛のT細胞性リンパ腫の１症例

日本黑牛T细胞淋巴瘤后肢瘫痪一例

• 发表时间: 2022
• 期刊: 産業動物臨床医学雑誌
• 作者: 佐伯陽平，永田健樹，大内義尚，伊藤宗磨，藤原玲奈;チェンバーズ ジェームズ，内田和幸，猪熊 壽
• 通讯作者: チェンバーズ ジェームズ，内田和幸，猪熊 壽

牛伝染性リンパ腫の病態進行に関与するヒストン修飾異常

组蛋白修饰异常参与牛传染性淋巴瘤的疾病进展

• 发表时间: 2022
• 作者: 前澤誠希;丸山玲緒;猪熊 壽
• 通讯作者: 猪熊 壽

EBL発症牛における腫瘍化B細胞あたりのBLVプロウイルス数に関する研究

EBL牛致瘤B细胞中BLV原病毒数量的研究

• 发表时间: 2021
• 作者: 前澤誠希;竹澤詩穂;坂口加奈;田中佑典;渡邉謙一;古林与志安;猪熊 壽
• 通讯作者: 猪熊 壽

牛伝染性リンパ腫ウイルスの母子感染における性状解析

传染性牛淋巴瘤病毒母婴传播特征分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 原 幸大;橋本 博;和田 啓;岡本麻里，杉浦勝明，小熊圭祐，猪熊 壽，遠藤麻衣子，THI Le Dung，山下(川西)奈那子，芳賀 猛
• 通讯作者: 岡本麻里，杉浦勝明，小熊圭祐，猪熊 壽，遠藤麻衣子，THI Le Dung，山下(川西)奈那子，芳賀 猛

A clinical case of enzootic bovine leukosis diagnosed by clonal analysis of peripheral B-cell in a Japanese Black cow.

通过对日本黑牛外周 B 细胞进行克隆分析诊断出的地方性牛白血病临床病例。

• DOI: 10.1007/s00580-022-03432-3
• 发表时间: 2023
• 期刊: Comp. Clin. Pathol.
• 作者: Inokuma;H.;Nagata;T.;Maezawa;M.;Watanabe;K.;Kobayashi;Y.;Kojima;K.;Chambers;JK.;Uchida;K.
• 通讯作者: K.