Role of extracellular enzymes for the development, maintenance and degradation of biofilms

细胞外酶在生物膜的形成、维持和降解中的作用

• 批准号: 5386181
• 负责人: Dr. Jost Wingender
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Aquatische Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5386181?language=en
• 关键词: Role; extracellular; enzymes; development; maintenance

Bisher konnte gezeigt werden, dass Pseudomonas aeruginosa unter Biofilm-Bedingungen extrazelluläre Enzyme bilden und in die Biofilm-Matrix aus extrazellulären polymeren Substanzen (EPS) sekretiert. Die verfügbar gewordene Genomsequenz von P. aeruginosa erlaubt jetzt eine globale Analyse des EPS-Proteoms. Hierzu sollen die EPS-Proteine mit zweidimensionaler Elektrophorese aufgetrennt und massenspektrometrisch identifiziert werden. Die Sekretion von Enzymen in Membranvesikeln, welche durch Ultrazentrifugation isoliert, biochemisch und immunologisch charakterisiert und elektronenmikroskopisch visualisiert werden, soll ebenfalls untersucht werden. Zur Klärung der Rolle extrazellulärer Enzyme für Aufbau und Abbau von Biofilmen werden zwei Ansätze gewählt: (1) Biofilme werden mit Enzymdefektmutanten angezüchtet, dann biochemisch und mit dem konfokalen Laser-Scanning-Mikroskop charakterisiert; (2) mit Hilfe von Enzym-Reportergen-Fusionen wird die transkriptionelle Regulation der Enzymgene untersucht. Die Biofilme werden auf Agar-Nährmedien und in Durchflusszellen angezüchtet, damit die Kinetik der Bildung extrazellulärer Enzyme und der Biofilm-Bildung bestimmt werden kann.

Biofilm-Bedingungen下的铜绿假单胞菌extrazelluläre在Biofilm-Matrix上的酶bilden和在Biofilm-Matrix上的polymeren Substanzen (EPS) sekretiert。铜绿假单胞菌基因组序列分析。电镜分析与质谱法鉴定eps -蛋白的研究。膜中酶的分泌，超微离心分离，生化和免疫学特性，电子显微观察，可视化观察，生物化学和免疫特性。Zur Klärung der Rolle extrazellulärer酶学<e:1> r Aufbau和Abbau von Biofilmen werden zwei Ansätze gewählt:(1) Biofilme werden mit酶学变异因子<e:1> (Enzyme defktmutanten angezchet)，生物化学和生物化学研究；(2)酶的转录调控。Die Biofilme werden auf Agar-Nährmedien und in Durchflusszellen angez<e:1> chet， damit Die Kinetik der Bildung extrazellulärer酵素und der Biofilme -Bildung bestestimmt werden kann。