転写因子活性に着目したアルコール依存症とうつ病の新規治療マーカーの開発

开发针对酗酒和抑郁症的新治疗标记物，重点关注转录因子活性

• 批准号: 21791138
• 负责人: 石井 貴男
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21791138/
• 关键词: 神経幹細胞; アルコール; 転写因子; 抗うつ薬

本研究では、精神疾患の病態解明、さらには新たな診断、治療への応用の可能性を念頭に、種々の薬剤を処置した神経幹細胞における神経新生に関連する転写因子(CREBおよびNRSF)活性の解析を行った。神経幹細胞は胎齢13.5日のラット胎仔より取り出し、単層培養法を改良した方法で得た。神経幹細胞から神経細胞への分化機能の評価は,抗MAP2抗体陽性強度をELISA法にて定量化する方法で行った。転写因子の解析については、Western blotting法およびGel Shiftアッセイを応用したNo Shift法にて評価を行った。今回の研究では、種々の脳障害を引き起こすことが知られているエタノールと神経新生促進作用が知られている各種抗うつ薬を用いて検討を行った。エタノールは、神経幹細胞の生存に影響を与えない濃度において、神経幹細胞から神経細胞への分化を抑制した。一方、各種抗うつ薬はこのエタノールの神経分化抑制を軽減させる作用を示した。次に、転写因子CREBの変化を調べた。神経幹細胞にエタノールを処置することによって、細胞分化に大きな役割をもつCREBの活性低下(リン酸化CBEBの減弱)が観察された。また、抗うつ薬のうち,Amitriptyline、およびSertralineはリン酸化CREB活性を増加させる作用を示した。一方、FluoxetineおよびParoxetineは、アルコールによって減弱したリン酸化CREB活性に影響を及ぼさなかった。神経遺伝子転写抑制因子であるNRSFは、エタノールの処置により活性が増加した。抗うつ薬のうち、Fluoxetine, Paroxetine、およびSertralineはNRSF活性を低下させる作用を示したが、Amitriptylineはアルコールによって増加したNRSF活性に影響を及ぼさなかった。これらの結果より、抗うつ薬がエタノールの神経幹細胞分化機能障害を改善させる機序として、神経幹細胞内の転写因子CREB系の変化に加え,神経遺伝子転写抑制因子NRSFの活性調節機構変化の重要性が考えられた。加えて,各抗うつ薬が作用する転写因子のキャラクター解析から、CREB系の促進を主体とするタイプ、あるいはNRSFの抑制を主体とするタイプが存在する可能性が考えられた。

This study aims to elucidate the pathologies of mental disorders, and to analyze the activity of novel neurologist factors (CREB and NRSF) associated with the development of neurogenesis in stem cells, including the possibility of diagnosis, treatment, and treatment of these disorders. Neural stem cells were isolated from 13.5-day-old embryos by an improved monolayer culture method. The differentiation function of neural stem cells from neurons is evaluated by quantifying the positive intensity of anti-MAP2 antibody by ELISA. The analysis of writing factors is based on Western blotting and Gel Shift analysis. The present study is aimed at exploring the effects of various anti-tumor agents on the promotion of neurogenesis. The effect of concentration on the survival of neural stem cells and the inhibition of differentiation of neural stem cells One side, a variety of anti-drug drugs to reduce the role of differentiation inhibition Second, the change of CREB factor is adjusted. The decrease of CREB activity (decrease of CBEB activity) was observed during the treatment of stem cells and cell differentiation.また、抗うつ薬のうち,Amitriptyline、およびSertralineはリン酸化CREB活性を増加させる作用を示した。One side, Fluoxetine and Paroxetine, reduce the activity of CREB and reduce its toxicity. The activity of NRSF in the treatment of neurotransmitter inhibition factors increased. The effect of fluoxetine, paroxetine, and Sertraline on NRSF activity decrease and that of Amitriptyline on NRSF activity increase. These results indicate that the mechanism of improving the functional impairment of differentiation of neural stem cells by anti-tumor drugs, the transformation of CREB family in neural stem cells, and the importance of the transformation of NRSF activity regulatory mechanism in neural stem cells are discussed. In addition, the possibility of the existence of the main body of the CREB system promotion and the main body of the NRSF inhibition is examined.

项目成果

How do ethanol and depression impair neural stem cell? Dys regulation of CREB, NRSF/REST and TLX.

乙醇和抑郁症如何损害神经干细胞？

• 发表时间: 2009
• 作者: Ishii T;et al.
• 通讯作者: et al.

アルコールによる脳障害に対する再生医療的アプローチの可能性

再生医学方法治疗酒精引起的脑损伤的可能性

• 发表时间: 2009
• 期刊: 日本アルコール・薬物医学会雑誌 44
• 作者: 橋本恵理;吉永敏弘;石井貴男;他
• 通讯作者: 他

The common aspects of pathophysiology of alcoholism and depression.

酗酒和抑郁症病理生理学的共同点。

• 发表时间: 2009
• 期刊: 日本アルコール・薬物医学会雑誌 44
• 作者: 鵜飼渉;石井貴男;橋本恵理;館農勝;吉永敏弘;小野貴文;渡邊公彦;渡邉一平;白坂知彦;齋藤利和
• 通讯作者: 齋藤利和