バベシア原虫のヘモグロビン分解経路の解明と新規治療薬の開発

巴贝虫原虫血红蛋白降解途径的阐明及新治疗药物的开发

• 批准号: 10F00419
• 负责人: 鈴木 宏志
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10F00419/
• 关键词: Babesia bovis; ヘモグロビン; BbvLAP; ベスタチン; BbLAP; Bestatin; Babesia gibsoni; 治療薬; cDNAライブラリー; ESTデータベース

本研究は、バベシア原虫の赤血球内寄生機構の一環としてヘモグロビン分解経路の解明に焦点を当て、それに基づいた新規治療法の開発を目指して企画した。前年度までに以下の結果が得られている。(1)ウシバベシア原虫(Babesia bovis)のヘモグロビン分解に関わると推定されるロイシンアミノペプチダーゼ(BbvLAP)遺伝子をクローニングし、組換えBbvLAPを作製した。(2)抗組換えBbvLAP抗体を作製し、虫体におけるBbvLAPの局在を特定した。(3)組換えBbvLAPの酵素活性を確認した。今年度は主に以下の結果が得られた。(1)組換えBbvLAPのアミノペプチダーゼ活性を詳細に調べたところ、K_m値が139,3±30.25μMで、V_<max>値は64.83±4.61μM/minであった。(2)組換えBbvLAPの酵素活性はロイシンアミノペプチダーゼのインヒビターとして知られるベスタチンにより特異的に抑制された。(3)試験管内培養における虫体増殖抑制試験を行ったところ、IC_<50>値は131.7±51.43μMであった。(4)これらの結果は、BbvLAPを標的としたウシバベシア原虫感染症の治療薬開発の可能性を示唆するものである。

这项研究的重点是阐明血红蛋白降解途径，这是原生动物原生动物的内核细胞寄生虫的一部分，并计划基于此开发一种新的治疗方法。在上一年获得以下结果：（1）亮氨酸氨基肽酶（BBVLAP）基因，假定该基因与原生动物牛Babesia babesia bovis的血红蛋白降解有关，被串联以产生重组BBBVLAP。 （2）准备抗重组BBVLAP抗体，以鉴定BBVLAP在蠕虫体中的定位。 （3）确认重组BBVLAP的酶活性。今年，主要获得以下结果：（1）当详细检查重组BBVLAP的氨基肽酶活性时，K_M值为139,3±30.25μm，V_ <max>值为64.83±4.61μm/min/min。 （2）重组BBVLAP的酶活性被Bestatin（被称为亮氨酸氨基肽酶抑制剂）特异性抑制。 （3）进行体外培养时，IC_ <50>值为131.7±51.43μm。 （4）这些结果表明有可能为靶向BBVLAP的牛Babesia原生动物感染开发治疗剂。

项目成果

Molecular detection and identification of Babesia bovis and Babesia bigemina in cattle in northern Thailand

• DOI: 10.1007/s00436-012-2960-4
• 发表时间: 2012-09-01
• 期刊: PARASITOLOGY RESEARCH
• 影响因子: 2
• 作者: Cao, Shinuo;Aboge, Gabriel Oluga;Xuan, Xuenan
• 通讯作者: Xuan, Xuenan

Precursors of methotrexate target dihydrofolate reductase-thymidylate synthase of Babesia gibsoni and inhibit parasite proliferation

甲氨蝶呤前体靶向吉氏巴贝虫二氢叶酸还原酶-胸苷酸合酶并抑制寄生虫增殖

• 发表时间: 2010
• 期刊: J.Protozool.Res.
• 作者: Aboge;et al
• 通讯作者: et al