分化誘導したSH-SY5Y細胞におけるメタンフェタミンの細胞毒性

甲基苯丙胺对分化的 SH-SY5Y 细胞的细胞毒性

• 批准号: 10J00130
• 负责人: 奈良 明奈
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J00130/
• 关键词: メタンフェタミン; マクロピノサイトーシス; 細胞死; リソソーム; SH-SY5Y細胞; レチノイン酸

本年度では、「METH 曝露によるマクロピノサイトーシスの過形成が、神経毒性作用にどう関わっているか」、「METH 曝露によるマクロピノソーム過形成がもたらすリソソーム機能変化」について検討を行い、『METHによる新たな細胞死経路機序の確立』を目指すこととした。第一に、GFP-Ras及びGFP-Rac1を用いた蛍光観察では、METH曝露2時間後の細胞内空胞と局在が一致した。また、RasインヒビターのFTS及びRac1インヒビターのEHT1864を前投与したところ、METH曝露による細胞内空胞形成が有意に消失した。以上より、METHによる細胞内空胞がマクロピノサイトーシス経路に沿って進行していることが確認された。第二に、リソソームの活性化について検討した結果、lamp1,2の発現はMETH曝露の時間依存的に上昇し、カテプシンLのプロセシングは有意に減少した。また、オートファジー関連分子変動では、LC3-IIの発現は有意に上昇する一方、p62の発現減少が認められなかったことから、METH曝露後では、オートファゴソームの形成までは進行しているが、オートファゴソームの分解が阻害されている可能性が確認された。以上より、METH曝露後のマクロピノソーム過形成により、マクロピノソームからリソソームへの移行に伴うリソソームの肥大化により、リソソームの正常機能が低下し、本来のオートファジーの流れを正常に維持できなくなることで、細胞内にMETHを含んだ未消化物質が増大し、最終的に細胞死を引き起こしている可能性が考えられた。以上の結果を総括すると、高濃度METHの曝露により、細胞内でマクロピノサイトーシスが過剰に形成され、このマクロピノソームがリソソームと融合することで、リソソーム内での正常な機能が保てなくなり、最終的に細胞死に至ると考えられた。

, this year's で は "METH exposure に よ る マ ク ロ ピ ノ サ イ ト ー シ ス の form が, god 経 toxic effect に ど う masato わ っ て い る か", "METH Exposure に よ る マ ク ロ ピ ノ ソ ー ム had formed が も た ら す リ ソ ソ ー ム function - "に つ い て beg を 検 い," METH に よ る new た な cell death 経 の way machine sequence to establish "を refers す こ と と し た. First に, GFP - Ras and び GFP - Rac1 を with い た 蛍 light 観 examine で は, METH の empty cells in the cell after exposure time 2 と bureau in が consistent し た. ま た, Ras イ ン ヒ ビ タ ー の FTS and び Rac1 イ ン ヒ ビ タ ー の EHT1864 を before and し た と こ ろ, METH exposure に よ る empty cells in the cell formation が intentionally に disappear し た. Above よ り, METH に よ る empty cells in the cell が マ ク ロ ピ ノ サ イ ト ー シ ス に 経 road along the っ て in し て い る こ と が confirm さ れ た. Second に, リ ソ ソ ー ム の activeness に つ い て beg し 検 た results, lamp1, 2 の 発 now は METH exposure の rising time dependent に し, カ テ プ シ ン L の プ ロ セ シ ン グ は intentionally に reduce し た. ま た, オ ー ト フ ァ ジ ー masato even molecules - move で は, LC3 - II の 発 now rising は intentionally に す る side, p62 の 発 now reduce が recognize め ら れ な か っ た こ と か ら, METH exposure after で は, オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム の form ま で は for し て い る が, オ ー ト フ ァ ゴ ソ ー ム の decomposition が resistance against さ れ て い が る possibility for confirmation Youdaoplaceholder0. Above よ り, METH exposure after の マ ク ロ ピ ノ ソ ー ム had formed に よ り, マ ク ロ ピ ノ ソ ー ム か ら リ ソ ソ ー ム へ の transitional に with う リ ソ ソ ー ム の fat russsian に よ り, リ ソ ソ ー ム の normal function が し, originally の オ ー ト フ ァ ジ ー の flow れ を に maintain normal で き な く な る こ と で, intracellular に METH を containing ん だ yet The increase of digestive substances が and the eventual death of に cells を raise the possibility of <s:1> て る る る が examination えられた. の above results を 総 enclosed す る と, high concentration of METH の exposure に よ り, intracellular で マ ク ロ ピ ノ サ イ ト ー シ ス が before turning に form さ れ, こ の マ ク ロ ピ ノ ソ ー ム が リ ソ ソ ー ム と fusion す る こ と で, リ ソ ソ ー ム within で の function of normal な が bao て な く な り, final に に cell death to る と exam え ら れ た.

项目成果

Methamphetamine induces macropinocytosis in differentiated SH-SY5Y human neuroblastoma cells

• DOI: 10.1016/j.brainres.2010.07.043
• 发表时间: 2010-09-17
• 期刊: BRAIN RESEARCH
• 影响因子: 2.9
• 作者: Nara, Akina;Aki, Toshihiko;Uemura, Koichi
• 通讯作者: Uemura, Koichi

Methamphetamine-caused cytotoxic effects involves macropinocytosis in differentiated SH-SY5Y cells

甲基苯丙胺引起的细胞毒性作用涉及分化的 SH-SY5Y 细胞中的巨胞饮作用

• 发表时间: 2011
• 作者: Akina Nara;Toshihiko Aki;Takeshi Funakoshi;Kana Unuma;Koichi Uemura
• 通讯作者: Koichi Uemura

Signaling pathway of macropinocytosis by mlethamphetamine in human neuroblastoma cells

苯丙胺对人神经母细胞瘤细胞巨胞饮作用的信号通路

• 发表时间: 2011
• 作者: Akina Nara;Toshihiko Aki;Takeshi Funakoshi;Kana Unuma;Koichi Uemura
• 通讯作者: Koichi Uemura

メタンフェタミンは分化誘導させたSH-SY5Y細胞においてマクロピノサイトーシスを誘導する

甲基苯丙胺诱导分化的 SH-SY5Y 细胞巨胞饮作用

• 发表时间: 2010
• 作者: 奈良明奈;秋利彦;船越丈司;上村公一
• 通讯作者: 上村公一