環境適応型ハイブリッドべん毛モーターのトルク特性と固定子の結晶構造解析
环境自适应混合鞭毛电机扭矩特性及定子晶体结构分析
基本信息
- 批准号:10J01439
- 负责人:
- 金额:$ 1.79万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2010
- 资助国家:日本
- 起止时间:2010 至 2012
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、好アルカリ性細菌Bacillus clausiiの環境適応型ハイブリッドべん毛モーター固定子MotAB複合体の結晶化およびx線構造解析を行い、イオン選択性における原子レベルでのメカニズムの解明とべん毛モーターの回転機構の解明を目的とした。さらに、共役イオンが変化する環境適応型べん毛モーターのビーズアッセイ法による1分子回転計測を行うことで、エネルギー変換における新たな知見を得ることを目指した。結晶構造解析においては、B.clausiiのMotAB複合体とともに好アルカリ性Bacillus属細菌に共通の固定子Motps複合体の両方を結晶構造解析のターゲットタンパク質とした。Motps複合体に関しては、よく単分散した高純度精製サンプルの調製に成功し結晶化を試みてきたが、得られた結晶はすべて界面活性剤由来のもので、タンパク結晶はまだ得られていない。現在、他の界面活性剤を検討するとともに、脂質膜を用いた2次元結晶の作製を行っている。一方、B.clausiiのMotAB複合体に関しては複合体での発現が困難であるため、モーターへの組み込みに重要とされているMotBタンパク質のC末端側ドメインの精製および結晶化を試みた。その結果、いくつかの条件下においてタンパク結晶が得られたが、構造解析に至るほどの分解能を有していなかった。現在、結晶化条件の最適化を行い、構造解析に適した結晶の作製を行っている。1分子回転計測では、H^+とNa^+をそれぞれ共役イオンとして利用する固定子MotABとMotPSの両方を持つBacillus subtilisの系で測定を試みた。その結果、MotPSはMotABに比べ、最大トルクおよび最高速度が低いことが分かり、べん毛基部体に組み込まれにくく、チャネル活性も低いことが示唆された。現在、これらを指標に、B.clausiiのMotABを発現させ、測定中である。
This study is aimed at elucidating the crystallization and X-ray structure of MotAB complex from Bacillus clausii, an environmentally friendly bacterium, and the molecular structure of MotAB complex. The first step is to change the environment, and the second step is to change the environment. Crystal Structure Analysis of MotAB Complex of B.clausii and Motps Complex of Bacillus Motps complexes are highly dispersed, highly purified, and successfully prepared for crystallization. Now, other interfacial active agents are discussed, and lipid films are used to prepare two-dimensional crystals. The MotAB complex of one side and B.clausii is related to the difficulty in the development of the complex. It is important to refine and crystallize the MotAB complex. As a result, under the condition of high temperature, high temperature Optimization of crystallization conditions, structural analysis, and appropriate crystallization processes 1-molecule backscatter measurement is an attempt to measure the interaction between H^+ and Na^+ and the Bacillus subtilis system using the combination of the fixed molecules MotAB and MotPS. Results: MotPS MotAB ratio, maximum speed, maximum speed Now, the index, B.clausii's MoAB, and the determination.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
外環境pHによりイオン選択性が変化するべん毛モーター固定子のX線結晶構造解析.
鞭毛电机定子的 X 射线晶体结构分析,其离子选择性随外部 pH 值变化。
- DOI:
- 发表时间:2012
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:近藤孝文;菅晃一;楊金峰;樋川智洋;法澤公寛;小林仁;小方厚;吉田陽一;寺原直矢
- 通讯作者:寺原直矢
異なる2種類の固定子で駆動する枯草菌べん毛モーターのトルク特性の解析.
两种不同类型定子驱动的枯草芽孢杆菌鞭毛电机扭矩特性分析。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:寺原直矢;et al
- 通讯作者:et al
2種類の異なる固定子から構成されるべん毛モーターのトルク特性の解析. Torque-speed relationship of the flagellar motor consisting of two distinct stators.
由两个不同定子组成的鞭毛电机的扭矩-速度关系。
- DOI:
- 发表时间:2012
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Terahara;N.;et al
- 通讯作者:et al
好アルカリ性Bacillius属細菌の分子系統学的解析から見つかった”K+で駆動する”新奇べん毛モーター
通过嗜碱芽孢杆菌的分子系统发育分析发现了一种由 K+ 驱动的新型鞭毛马达
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:寺原直矢;et al
- 通讯作者:et al
好アルカリ性Bacillus属細菌のべん毛モーター固定子の分子系統学的解析と新規べん毛モーターの発見
嗜碱芽孢杆菌鞭毛电机定子的分子系统发育分析和新型鞭毛电机的发现
- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:寺原直矢;et al
- 通讯作者:et al
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