血管異常収縮の原因分子である新規スフィンゴ脂質の産生メカニズムの解明
阐明新型鞘脂(一种导致异常血管收缩的分子)的产生机制
基本信息
- 批准号:10J04493
- 负责人:
- 金额:$ 1.79万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2010
- 资助国家:日本
- 起止时间:2010 至 2012
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本年度は、血管異常収縮の原因分子であるスフィンゴシルボスホリルコリン(SPC)が、活性酸素の一種であるOHラジカル依存的に、スフィンゴミエリン(SM)から産生されることを、分子・細胞レベルで証明するための研究を行い、以下の成果を得た。1.分子レベル:OHラジカル依存的なSPC産生が特異的な反応であるかどうかを検討するため、SM分解産物について、インフユージョン導入法によるLC-MS分析を行った。これまでのSPC産生溶液においては、SMを完全に溶解させるため、TritonX-100を含む溶液を用いていたが、直接的なインフユージョン導入法では分析を阻害するため、TritonX-100を含まない溶液を用いて反応を行った。LC-MS分析の結果としては、SPCのm/zである465.3付近にシグナルの僅かな増加が認められ、また、それ以外のいくつかのm/zにおいても増加が認められた。以上のことは、OHラジカル依存的に複数のSM分解産物が生じている可能性、および、SPC産生量については、溶液組成の影響を受ける可能性を強く示唆している。2.細胞レベル:本研究では、SPC産生メカニズムの基盤として、マクロファージのライソゾーム中における赤血球消化を想定している。そこで、ヒト単球系細胞THP-1を、や融刺激によりマクロファージ様細胞に分化させた後、赤血球(オプソニン化あり・なし)や赤血球膜ゴーストを食食させ、細胞内に生じるOHラジカルの量を蛍光指示薬であるHPFを用いて検出した。結果としては、これまでの実験でSPCが産生された条件である、オプソニン化赤血球を食食させた場合のみ、OHラジカルの著明な増加が認められた。以上のことから、ヘモグロビンを含む赤血球の食食・消化の過程でOHラジカルが産生され、そのOHラジカルが赤血球膜のSMに作用してSPCが生じている可能性が強く示唆された。
This year は, abnormal blood vessels 収 shrinkage の molecular で あ る ス フ ィ ン ゴ シ ル ボ ス ホ リ ル コ リ ン (SPC) が, active acid element の a で あ る OH ラ ジ カ ル dependent に, ス フ ィ ン ゴ ミ エ リ ン (SM) か ら produce さ れ る こ と を, molecular, cellular, レ ベ ル で prove す る た め を い, the following の の research を た. 1. Molecular レ ベ ル : OH ラ ジ カ ル dependent な SPC produce が specific な anti 応 で あ る か ど う か を beg す 検 る た め, SM decomposition product に つ い て, イ ン フ ユ ー ジ ョ ン import method に よ る LC - MS analysis line を っ た. こ れ ま で の SPC produce solution に お い て は, SM を に completely dissolved さ せ る た め, TritonX - 100 を を む solution with い て い た が, direct な イ ン フ ユ ー ジ ョ ン import method で は analysis を resistance against す る た め, TritonX - 100 を ま な を use い い solution て anti 応 を line っ た. LC - MS analysis results の と し て は, SPC の m/z で あ る pay nearly 465.3 に シ グ ナ ル の only か な raised plus が recognize め ら れ, ま た, そ れ outside の い く つ か の m/z に お い て も raised plus が recognize め ら れ た. Above の こ と は, OH ラ ジ カ ル に plural の SM breakdown products of interdependent が raw じ て い る possibility, お よ び discharge, SPC に つ い て は, solution composition の を by け る strong possibility を く in stopping し て い る. 2. Cells レ ベ ル : this study で は, SPC メ カ ニ ズ ム の base plate と し て, マ ク ロ フ ァ ー ジ の ラ イ ソ ゾ ー ム in に お け る red blood cell digestion を scenarios し て い る. そ こ で, ヒ ト 単 ball of THP 1 cells を, や stimulus に よ り マ ク ロ フ ァ ー ジ others in cells に さ せ た, after red blood corpuscle (オ プ ソ ニ ン change あ り · な し) や red blood cell membrane ゴ ー ス ト を food さ せ, intracellular に じ る OH ラ ジ カ ル の quantity を 蛍 light indicator 薬 で あ る HPF を with い て 検 out し た. Results と し て は, こ れ ま で の be 験 で SPC が produce さ れ た conditions で あ る, オ プ ソ ニ ン turn red blood corpuscle を food さ せ た occasions の み, OH ラ ジ カ ル の with Ming な raised が recognize め ら れ た. Above の こ と か ら, ヘ モ グ ロ ビ ン を containing む red blood corpuscle の food digestion の process で OH ラ ジ カ ル が produce さ れ, そ の OH ラ ジ カ ル が red blood cell membrane の SM に role し て SPC が raw じ て い る strong possibility が く in stopping さ れ た.
项目成果
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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Reactive oxygen species (ROS)-dependent prQdUction of sphingosylphosphorylcholine, a metabolite of sphingomyelin and a causative molecule of vaSospasm
活性氧(ROS)依赖性的鞘氨醇磷酰胆碱的产生,鞘氨醇的代谢物和血管痉挛的致病分子
- DOI:
- 发表时间:2012
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:M.Takahashi;T.Mizushima;K.Machida;高橋雅裕;M.Takahashi;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;Ito Takuma;伊藤拓真;Katsuko Kajiya;Dan xu;Yuichi Takada
- 通讯作者:Yuichi Takada
血管異常収縮の原因分子であるスフィンゴシルホスホリルコリンの産生における活性酸素の役割
活性氧在鞘氨醇磷酰胆碱(一种导致异常血管收缩的分子)产生中的作用
- DOI:
- 发表时间:2011
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:M.Takahashi;T.Mizushima;K.Machida;高橋雅裕;M.Takahashi;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;Ito Takuma;伊藤拓真;Katsuko Kajiya;Dan xu;Yuichi Takada;Yuichi Takada;高田雄一
- 通讯作者:高田雄一
Focused Proteomics による、血管平滑筋異常収縮の新規病的シグナル分子の探索
使用聚焦蛋白质组学寻找血管平滑肌收缩异常的新型病理信号分子
- DOI:
- 发表时间:2010
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:岸博子;岸 博子
- 通讯作者:岸 博子
New avenues to vascular disease prevention by food components
通过食品成分预防血管疾病的新途径
- DOI:
- 发表时间:2012
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:M.Takahashi;T.Mizushima;K.Machida;高橋雅裕;M.Takahashi;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;Ito Takuma;伊藤拓真;Katsuko Kajiya
- 通讯作者:Katsuko Kajiya
ROS-dependent production of sphingosylphosphorylcholine, a causal factor of vasospasm
ROS依赖性鞘氨醇磷酰胆碱的产生,这是血管痉挛的一个致病因素
- DOI:
- 发表时间:2012
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:M.Takahashi;T.Mizushima;K.Machida;高橋雅裕;M.Takahashi;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;石垣祐二;Ito Takuma;伊藤拓真;Katsuko Kajiya;Dan xu;Yuichi Takada;Yuichi Takada
- 通讯作者:Yuichi Takada
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