難治性痒みの発生機序の解明と臨床応用への試み

顽固性瘙痒发生机制的阐明及临床应用尝试

• 批准号: 10J04599
• 负责人: 冨永 光俊
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J04599/
• 关键词: アトピー性皮膚炎; 難治性痒み; 知覚神経線維; セマフォリン3A; 細胞外記録法; 脊髄; カルシウムイメージング; クロロキン; ガストリン放出ペプチド; NC/Ngaマウス

当初、1)正常ヒト表皮角化細胞(NHEK)での痒み関連物質産生の制御機構の解析及び2)痒み関連物質の知覚神経線維に対する影響について検討することを予定していた。しかし、東日本大震災の影響により、研究計画の変更、遅延が生じた。また、本年度は海外渡航先で最先端のかゆみ研究の技術及び知識を学び、申請書に記載した手法とは異なる電気生理学的アプローチで、マウス脊髄における痒み伝達様式の解明を目指した。1)NHEKでの痒み関連物質産生の制御機構の解析:表皮内神経の稠密化に関与するSemaphorin 3A(Sema3A)の発現は、AD表皮で低下する。この発現低下機序を解明するため、NHEKを様々なサイトカインで24時間刺激し、ウェスタンブロッティングでSema3Aの発現量を検討した。その結果、コントロール群と比較し、AD病態に関与するTSLP及びTNF-alphaで処理したNHEK群でSema3A発現が低下した。2)起痒物質の1次知覚神経に対する影響:マウス後根神経節(DRG)細胞を培養し、様々な起痒物質で刺激後、細胞内カルシウム流入変化をFura-2AMで検出した。その結果、PAR-2アゴニストでのDRG細胞内カルシウム流入がクロロキン(CQ)及びBAM8-22によって増強された。3)電気生理学的記録法によるマウス脊髄における痒み伝達機序の解明起痒物質CQをマウス足底に皮内投与し、細胞外記録法で脊髄CQ応答細胞の特性化を行った。次に、脊髄CQ応答細胞に着目し、NK1R、GlutamateR、GRPRアンタゴニストを脊髄灌流系内に投与し、各受容体系が脊髄での痒み伝達機序にどの程度関与するかについて検討した。現在、特許及び論文化に向けて準備中であるため、本研究の詳細は記載できない。このように、本研究は異なる側面から痒みを基礎的に研究し、末梢レベル(皮膚及び1次知覚神経)での痒み増強機構、中枢レベル(脊髄)での痒み伝達様式の一端を解明できる可能性を秘めている。

At the beginning, 1) normal ヒ ト epidermal keratinocytes (NHEK) で の itch み masato even substances mainly produce の imperial institutions の parsing and び 2) itch み masato know even the material の 覚 god 経 line d に す seaborne る influence に つ い て beg す 検 る こ と を designated し て い た. The impact of the Great East Japan earthquake is によ によ, the research plan is changed, 遅 is extended が じた. ま た, this year's は overseas tayouan で first most apex の か ゆ み research の を び, application technology and び knowledge recorded に し た gimmick と は different な る electric 気 physiology ア プ ロ ー チ で, マ ウ ス spinal marrow に お け る itch み 伝 of others type の interpret を refers し た. 1)NHEKで <s:1> itch み is related to substance production <s:1> control mechanism <e:1> analysis: the densification of the nerve in the epidermis に is related to the するSemaphorin 3A(Sema3A) する, AD the epidermis で is low する. こ の 発 now low machine sequence を interpret す る た め, NHEK を others 々 な サ イ ト カ イ ン で 24 time stimulate し, ウ ェ ス タ ン ブ ロ ッ テ ィ ン グ で Sema3A の を 発 now quantity beg し 検 た. そ の results, コ ン ト ロ ー ル group と し, AD pathological に masato and す る arrives and び TNF alpha で 処 Richard し た NHEK group で Sema3A 発 now low が し た. 2) itch material の one know god 覚 経 に す seaborne る impact: マ ウ ス root after god 経 section (DRG) cells を し, others 々 な itchy material で stimulation, intracellular カ ル シ ウ ム inflows - the を Fura - 2 am で 検 out し た. そ の results, PAR - 2 ア ゴ ニ ス ト で の DRG cells カ ル シ ウ ム inflows が ク ロ ロ キ ン (CQ) and び BAM8-22 に よ っ て raised strong さ れ た. 3) electricity 気 physiological recording に よ る マ ウ ス spinal marrow に お け る itch み 伝 da machine sequence の interpret the itch material CQ を マ ウ ス plantar に intradermal cast and し, extracellular recording で spinal marrow CQ 応 answer cell の characterization を line っ た. に, spinal marrow CQ 応 answer cell に し, NK1R, GlutamateR, GRPR ア ン タ ゴ ニ ス ト を ridge に shot within marrow perfusion system with し が ridge, the capacity system marrow で の itch み 伝 da machine sequence に ど masato の degree and す る か に つ い て beg し 検 た. Now, the charter and び on the culture of に are being prepared for けて であるため, and the detailed <s:1> of this study is recorded in で な な な に. こ の よ う に, this study は different な る side か ら itch み を し に research, peripheral レ ベ ル (skin and び one know god 覚 経) で の itch み raised strong institutions, central レ ベ ル (spinal marrow) で の itch み 伝 の end of others type を interpret で き る possibility を secret め て い る.

项目成果

Antimicrobial peptides human beta-defensins and cathelicidin LL-37 induce the secretion of a pruritogenic cytokine interleukin-31 by human mast cells.

抗菌肽人 β-防御素和抗菌肽 LL-37 诱导人肥大细胞分泌致痒细胞因子 IL-31。

• 发表时间: 2010
• 期刊: J Immunol. 184
• 作者: Niyonsaba F;Ushio H;Hara M;Yokoi H;Tominaga M;Takamori K;Kajiwara N;Saito H;Nagaoka I;Ogawa H;Okumura K.
• 通讯作者: Okumura K.

Thymic stromal lymphopoietin and tumor necrosis factor-a reduces the production of semaphorin 3A in cultured keratinocytes

胸腺基质淋巴细胞生成素和肿瘤坏死因子-a 减少培养的角质形成细胞中信号蛋白 3A 的产生

• 发表时间: 2011
• 作者: Tengara S;Tominaga M;Kamo A;Taneda K;Negi O;et al
• 通讯作者: et al

ドライスキンマウスの表皮内神経線維に対する紫外線療法、保湿・保護外用剤の影響

紫外线治疗和保湿/保护性外用药物对干性皮肤小鼠表皮内神经纤维的影响

• 发表时间: 2011
• 作者: 加茂敦子;冨永光俊;根木治;Suhandy Tengara;種田研一;高森建二
• 通讯作者: 高森建二

Intractable itch and nerve fibers-Penetration mechanisms of nerve fibers into epidermis-

顽固性瘙痒与神经纤维-神经纤维进入表皮的穿透机制-

• 发表时间: 2010
• 作者: Tominaga M;Takamori K
• 通讯作者: Takamori K

Effects of UV-based therapies, corticosteroid ointment and emollients on intraepidennal nerve fibers of acetone-treated mice

基于紫外线的疗法、皮质类固醇软膏和润肤剂对丙酮治疗小鼠表皮内神经纤维的影响

• 发表时间: 2011
• 作者: Kamo A;Tominaga M;Tengara S;Negi O;Taneda K;et al
• 通讯作者: et al