生理活性ペプチド・キトオリゴ糖類酵素合成に向けた加水分解酵素の機能解析・機能改変

生物活性肽/壳寡糖酶合成水解酶的功能分析和功能修饰

• 批准号: 10J08342
• 负责人: 臼木 博一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Research Institute for Biological Science Okayama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J08342/
• 关键词: 酵素合成; アミノリシス; 低子ペプチド; キトオリゴ糖

本研究課題においては、タンパク質工学的手法を駆使して「(1)生理活性低分子ペプチド合成触媒」および「(2)生理活性キトオリゴ糖類合成触媒」をそれぞれ開発し、これらの生体触媒を用いて、有用な新規生理活性物質を創生する事を最終目標としている。初年度においては実験材料となる酵素のスクリーニングと機能改変戦略の確立を第一の目標として研究を遂行した。これに並行して次年度以降に酵素合成のターゲットとする化合物群の絞り込みを兼ねて、有用価値の高い生理活性キトオリゴ糖アナログの探索研究を進めた。具体的な進捗状況は下記の通りであり、極めて順調であると考えている。(1)Acidothermus cellulolyticus由来Family S9 aminopeptidaseのクローニングと性状解析および、アミノリシス酵素への機能改変上記に関して、親酵素の取得と、機能改変およびそれを用いた低分子有用ペプチドの酵素合成を達成した。(2)ESI-MS/MSフラグメンテーションプロファイルを指標としたTMG-chitooligomycin類の探索と構造活性相関上記に関して、酵素合成のターゲット化合物となり得る二種類の新規オリゴ糖の単離と構造決定に成功した。

This research topic aims to develop and use biological catalysts and create new physiologically active substances by means of qualitative engineering. In the early years, the first goal of enzyme research was to establish the first goal of enzyme research In the next year, the research on the synthesis of enzymes and their high physiological activity has been carried out. The specific situation of the advancement is recorded in the next chapter. (1)Acidothermus cellulolyticus is derived from Family S9 aminopeptidase, characterized by its ability to analyze and modify the function of its enzyme. (2) The ESI-MS/MS system was successfully used to determine the structural activity of TMG-chitosomicin and its related factors.

项目成果

Peptide bond formation by aminolysin-A catalysis : A simple approach to enzymatic synthesis of diverse short oligopeptides and biologically active puromycins.

通过氨溶素-A 催化形成肽键：一种酶促合成多种短寡肽和生物活性嘌呤霉素的简单方法。

• 发表时间: 2011
• 期刊: Organic and bimolecular chemistry
• 作者: Usuki H;Yamamoto Y;Arima J;Iwabuchi M;Miyoshi S;Nitoda T;Hatanaka T.
• 通讯作者: Hatanaka T.

Acidothermus cellulolyticus由来family S9 アミノペプチダーゼのトランスアミノペプチダーゼへの機能変換

S9家族氨肽酶从解纤维热酸菌到转氨肽酶的功能转换

• 作者: 臼木博一;山本幸弘;岩渕雅樹;畑中唯史
• 通讯作者: 畑中唯史

MS/MS fragmentation-guided search of TMG-chitooligomycins and their structure-activity relationship in specific β-N-acetylglucosaminidase inhibition.

• DOI: 10.1039/c0ob01090a
• 发表时间: 2011-04
• 期刊: Organic & biomolecular chemistry
• 影响因子: 3.2
• 作者: H. Usuki;Yukihiro Yamamoto;Yuya Kumagai;T. Nitoda;H. Kanzaki;T. Hatanaka