体軸情報を備えた胚様体の作製
使用体轴信息创建拟胚体
基本信息
- 批准号:21657059
- 负责人:
- 金额:$ 1.98万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
- 财政年份:2009
- 资助国家:日本
- 起止时间:2009 至 2010
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
マウスのES細胞を浮遊培養すると、胚様体という凝集塊を形成する。その後、三胚葉を形成し、様々な組織を形成するが、極めて無秩序に分化するため、人為的に分化を制御することは難しい。そこで胚様体の性質のばらつきを調べるために、in situ hybridization法で各種分化マーカの染色をおこなった。その結果、同一シャーレ内の胚様体間だけでなく、単一胚様体内の細胞間でも性質のばらつきが非常に大きいことが明らかになった。特に中胚葉マーカは、day 8の胚様体でも約半数しか発現しておらず、さらに単一胚様体内においても発現細胞の分布はまばらであり、マウス胚のようにクラスター化されていなかった。また、原条前方マーカの発現も同様のばらつきを示したので、中胚葉の運命決定も無秩序であることが示唆された。そこで中胚葉の運命決定を均一なものにするために、FGFシグナルに着目した。マウス初期発生において、中胚葉の運命決定はFGFシグナルの濃度に依存する。したがって化学合成阻害剤でFGFシグナルのレベルを均一化できるのではないかと考えた。まず阻害剤の選別のために、マウス胚を各種FGFシグナル阻害剤で全胚培養し、FGFシグナル標的遺伝子の発現を調べたところ、PD173074という阻害剤が最も特異的かつ効果的であった。また、この阻害剤で受精後6-7日のマウス胚を培養したところ、Fgf8やその受容体Fgfr1の欠損胚と同様、沿軸中胚葉や中軸中胚葉マーカの発現異常を示した。特に沿軸中胚葉マーカの発現は阻害剤の濃度依存的に低下した。以上の結果より、胚様体のFGFシグナルをコントロールするための阻害剤として、PD173074は最も有力な候補であり、マウス胚においてはFGFシグナルのレベルを時期特異的にコントロールできることが明らかになった。
The を ウス <s:1> ES cells を are planktonic and cultured すると, and the embryonic bodies と う う agglutination masses を form する. , the three germ layer after そ の を し, others 々 な を forms す る が, extremely め て chaotic に differentiation す る た め, artificial に differentiation を suppression す る こ と は difficult し い. そ こ で embryo others body の nature の ば ら つ き を adjustable べ る た め に, in situ hybridization method で various differentiation マ ー カ の dyeing を お こ な っ た. そ の results and the same シ ャ ー レ の embryo in others body between だ け で な く, between one embryo cells の others 単 で も nature の ば ら つ き が very big に き い こ と が Ming ら か に な っ た. Trevor に mesoderm マ ー カ は, day 8 の embryo others で も about half し か 発 now し て お ら ず, さ ら に 単 others in an embryo in vivo に お い て も 発 の is cell distribution は ま ば ら で あ り, マ ウ ス embryo の よ う に ク ラ ス タ ー change さ れ て い な か っ た. ま た front, the original article マ ー カ の 発 も now with others の ば ら つ き を shown し た の で, mesoderm の destiny decided も chaotic で あ る こ と が in stopping さ れ た. The fortune of the embryo <s:1> in そ シグナ で で determines を uniformity な <e:1> にするために にするために, and FGFシグナ に に determines た た. The initial occurrence of にお ウス て is て て, and the fate of the mesoderm <s:1> determines that the <s:1> FGFシグナ <s:1> concentration に depends on する. し た が っ て chemical resistance against tonic で FGF シ グ ナ ル の レ ベ ル を homogenization で き る の で は な い か と exam え た. ま ず resistance against tonic の choose don't の た め に, マ ウ ス embryo を various FGF シ グ ナ ル resistance against tonic で whole embryo culture し, FGF シ グ ナ ル mark heritage 伝 son の 発 now を adjustable べ た と こ ろ, PD173074 と い う resistance against the most も tonic が specific か つ unseen fruit で あ っ た. ま た, こ の resistance against tonic で 6-7 days after fertilization の マ ウ ス embryo を cultivate し た と こ ろ, Fgf8 や そ の by let body Fgfr1 の owe damage of embryo と with others, along the axis of mesoderm や axial mesoderm マ ー カ の 発 abnormal を now shown し た. In the に along the axis of the blastoderm, there is a に カ カ カ カ カ <e:1> that shows a に low <s:1> た dependent on the concentration of <s:1> harmful agent <e:1>. の above results よ り, embryo others の FGF シ グ ナ ル を コ ン ト ロ ー ル す る た め の resistance against tonic と し て, PD173074 は も most powerful な alternate で あ り, マ ウ ス embryo に お い て は FGF シ グ ナ ル の レ ベ ル を period specific に コ ン ト ロ ー ル で き る こ と が Ming ら か に な っ た.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Dissecting the Role of Fgf Signaling During Gastrulation and Left-Right Axis Formation in Mouse Embryos Using Chemical Inhibitors
- DOI:10.1002/dvdy.22282
- 发表时间:2010-06-01
- 期刊:
- 影响因子:2.5
- 作者:Oki, Shinya;Kitajima, Keiko;Meno, Chikara
- 通讯作者:Meno, Chikara
Reversal of left-right asymmetry induced by aberrant Nodal signaling in the node of mouse embryos
- DOI:10.1242/dev.039305
- 发表时间:2009-12-01
- 期刊:
- 影响因子:4.6
- 作者:Oki, Shinya;Kitajima, Keiko;Meno, Chikara
- 通讯作者:Meno, Chikara
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