マウス胚ノードのNodalシグナルが左右非対称に側板中胚葉へ伝わる機構の解明

阐明小鼠胚胎节点的节点信号不对称传递至侧板中胚层的机制

基本信息

批准号：
05J09793
负责人：
沖真弥
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

前年に引き続き、私はノードから側板中胚葉へのNodalシグナル伝達には硫酸化グリコサミノグリカンが必要であることを明らかにした。前年までは、Nodalはヘパリンに結合することを示したが、今回私はNodalはコンドロイチン硫酸に結合するが、ヘパラン硫酸には結合しないことを明らかにした。さらにコンドロイチン硫酸とヘパラン硫酸は共にノードと側板中胚葉の間の基底膜に局在し、ちょうど両者をつなぐような分布をしていることを明らかにした。そこノードで作られたNodalがコンドロイチン硫酸やヘパラン硫酸を伝って、側板中胚葉まで運ばれるのではないかと思い、以下の実験により検証した。まず塩素酸ナトリウムによりコンドロイチン硫酸とヘパラン硫酸の両者の合成を阻害すると、ノードのNodalは発現するが、側板中胚葉のNodal発現が抑制されることを示した。さらにxylosideでコンドロイチン硫酸のみの合成を阻害した場合も同様に側板中胚葉のNodal発現が抑制されることを示した。これらの実験では側板中胚葉がNodalを発現できないような状態になっているにすぎないとも考えられるので、両阻害実験において右側の側板中胚葉にNodalの発現ベクターを導入したところ、Nodalは右側に発現しており、側板中胚葉はNodalを発現できる状態にあることを確認した。これらの結果より、ノードで作られたNodalはコンドロイチン硫酸を伝って、側板中胚葉まで運ばれること、さらにその過程にはヘパラン硫酸だけでは不十分であることか示唆された。

从上一年开始，我透露，从节点到侧板中胚层的淋巴结信号传导需要硫酸化的糖胺聚糖。直到上一年，Nodal才显示肝素结合，但是这次我透露淋巴结与硫酸软骨素结合，但不与硫酸乙酰肝素结合。此外，据透露，硫酸软骨素和硫酸乙酰肝素都位于节点和侧板中胚层之间的地下膜，并且分布完全像连接它们。我认为在节点上制造的淋巴结将通过硫酸软骨和硫酸乙酰肝素运输到侧板中胚层，因此我使用以下实验对其进行了验证。首先，结果表明，当硫酸钠和硫酸乙酰肝素的合成被氯酸钠抑制时，表达了淋巴结的淋巴结表达，但是抑制了侧板中胚层的淋巴结表达。此外，当单独硫酸软骨素的合成被木糖苷抑制时，类似抑制了侧板中胚层的淋巴结表达。在这些实验中，人们认为，侧板中胚层仅处于无法表达淋巴结的状态，因此在两个抑制实验中，都将淋巴结表达向量引入到侧板中码的右侧，并且确认节点在右侧表达了侧板，并且表达了侧板的表达，并且在其中表达了一个状态。这些结果表明，在节点上制成的淋巴结通过硫酸软骨素运输到侧板中胚层，而单独的硫酸乙酰肝素是不够的。