水田土壌における脱窒微生物共存系の存在を探る

探讨水稻土反硝化微生物共存系统的存在性

• 批准号: 21658024
• 负责人: 妹尾 啓史
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21658024/
• 关键词: 水田土壌; 脱窒微生物; 微生物共存系; Functional Single Cell分離法

目的:本研究では単一菌株においてよりも異種細菌の共存状態において脱窒活性の高まる共存系を「脱窒微生物共存系」とし、その発見、機能と生態の解明を目的とした。21年度の結果から、「脱窒微生物共存系」の存在が示唆されたものの、その確定には至らず、その候補となる共存系も2組と少なかった。そこで、より効率的に「脱窒微生物共存系」を分離する方法が求められた。方法:21年度の分離法では、水田土壌ミクロコズムからFSC分離法により共存系を分離するまでの過程で、土壌中で近接していることが予想される「脱窒微生物共存系」が分散してしまっている可能性があり、そのことが「脱窒微生物共存系」の分離を困難にしていると考えられた。そこで、脱窒活性を高めた水田土壌ミクロコズムから土壌懸濁液を調整し、30μlずつを分注したうえで細胞分裂阻害剤を添加した。これにより「脱窒微生物共存系」の存在によって増殖が可能になり、細胞が伸長する菌株が存在した場合、その共存系を構築する菌株はこの30μlの土壌懸濁液中に存在することとなる。このことにより、「脱窒微生物共存系」の分散を抑えることが可能になり、分離した共存系が実際に環境中で共存系を構築している蓋然性を高めることが可能になった。共存系の分離後、単一菌株の純粋分離培養を行い、再び共存系を構築して単一菌株と共存系それぞれの脱窒活性を比較した。結果:34組の共存系について純粋分離培養を行い84菌株を得た。そのなかで3組のについて「脱窒微生物共存系」であることが示唆された。また、21年度に分離した共存系について追試を行った所、あらたに2組が「脱窒微生物共存系」であることが示唆された。

Objective: this study で は 単 a strain に お い て よ り も heterogeneous bacteria の coexistence に お い て smothering off high active の ま る coexistence of を "to take off the smothering microbial coexistence" と し, そ の 発 see, functional と ecological の interpret を purpose と し た. 21st annual の results か ら, "take off the smothering microbial coexistence" の is が in stopping さ れ た も の の, そ の determine に は to ら ず, そ の alternate と な る coexistence is less も two groups と な か っ た. The に "denitrified microbial coexistence line" を isolation する method が to find められた for the efficacy of そ が で で and よ よ. Methods: 21 year の separation で は, paddy soil 壌 ミ ク ロ コ ズ ム か ら FSC separation に よ り coexistence of を separation す る ま で で の process, で nearly in the soil 壌 し て い る こ と が to think さ れ る "to take off the smothering microbial coexistence" scattered が し て し ま っ て い る possibility が あ り, そ の こ と が "to take off the smothering microbial coexistence" を の separation difficult に し て Youdaoplaceholder0 ると test えられた. そ こ で, smothering high active を め た paddy soil 壌 ミ ク ロ コ ズ ム か ら soil 壌 suspension を adjustment し, 30 mu l ず つ を points note し た う え で cell division resistance against tonic を add し た. こ れ に よ り "microbes to take off the smothering coexistence" の exist に よ っ て rights may reside が に な が り, cell elongation す る strains exist が し た occasions, そ の coexistence of を build す る strains は こ の 30 mu l 壌 の soil suspension に exist す る こ と と な る. こ の こ と に よ り, "take off the smothering microbial coexistence" scattered の を え suppression る こ と が may に な り, separating し た coexistence of が be interstate に で coexist in the environment department を build し て い る high probability を め る こ と が may に な っ た. Coexistence is の separated cultivation, a strain の 単 pure 粋 を い, again び coexistence department を build し て 単 と coexistence is a strain そ れ ぞ れ の smothering active を off more し た. Result :34 groups of <s:1> coexisting lines に に て て て pure 粋 isolated and cultured を rows of を 84 strain を obtained た. Youdaoplaceholder0 な な で で three groups of <s:1> に とが て て て て て "coexistence of anaerobic microorganisms" である とが とが suggest された. ま た separation, the 21st annual に し た coexistence of に つ い て line after try を っ た, あ ら た に が 2 group "to take off the smothering microbial coexistence" で あ る こ と が in stopping さ れ た.