時間栄養学による脂質代謝異常の改善と摂食タイミングによる肝臓時計同調機構の解析

计时营养改善脂代谢异常及饲喂时间解析肝钟同步机制

基本信息

批准号：
21658052
负责人：
小田裕昭
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21658052/
关键词：
時間栄養学脂質代謝肝臓コレステロール概日リズム

项目摘要

1.ラット初代培養肝細胞を用いて、肝細胞の概日リズム発振について検討した。ラット初代培養細胞は、培養後も自律的な時計を維持していることが明らかとなった。また、細胞外マトリクスの影響を受け、再構成基底膜ゲルであるEHS-gel上で3次元培養することにより、概日時計は長く維持されることが分かった。食餌因子の中で、概日時計を制御する因子を探索する目的で、この3次元培養法を用いて、培地にアミノ酸を添加して、時計遺伝子に与える影響を検討した。そうしたところ、いくつかのアミノ酸に、時計遺伝子の発現を変動させる作用があることが分かった。2.接触リズム崩壊モデルを用いて脂質代謝異常を検討した。これまで摂食リズムを崩壊させることでコレステロール代謝に異常が生じることを明らかにしてきたが、そのメカニズムを検討する目的として、それぞれの遺伝子の転写レベルでリズムの異常が生じているか検討する目的で、主要な時計遺伝子の転写速度を測定した。転写速度の測定は、転写直後の未成熟mRNAの量を測定することにより間接的な方法によって測った。そうしたところ、摂食リズムを崩壊させた動物では、その時計遺伝子の転写レベルで異常が生じていることが分かった。複数の時計遺伝子の中で、摂食リズムの影響を強く受ける遺伝子と、そうでない遺伝子があることが分かった。これらの、転写速度を測定すると、摂食リズムの影響を受けていないと考えられた遺伝子においても、影響を受けていることが分かった。

1。使用原代培养的大鼠肝细胞研究了肝细胞的昼夜节律振荡。据表明，即使在培养后，原发性大鼠培养的细胞也仍然是自主的。此外，发现昼夜节律的时钟长期以来保持了3D培养在EHS-GEL上，Ehs-Gel是一种重构的地下膜凝胶，受细胞外基质的影响。为了寻找控制昼夜节律因素之间的因素，使用3D培养方法将氨基酸添加到培养基中并研究对时钟基因的影响。这表明几种氨基酸具有改变时钟基因表达的作用。 2。使用接触节律破坏模型研究了脂质代谢异常。到目前为止，我们已经透露，破坏喂食节奏会引起胆固醇代谢的异常，但是为了检查这种机制，我们测量了主要时钟基因的转录速率，以确定节奏异常是否在每个基因的转录水平下发生。通过间接方法测量转录率测量通过转录后立即测量未成熟mRNA的量来测量。这表明异常发生在破坏其喂养节奏的动物中时钟基因的转录水平。在多个时钟基因中，发现某些基因受喂养节奏和一些不影响的基因影响。当测量转录率时，发现人们认为不受喂养节律影响的基因也受到影响。