糖・脂質代謝研究に有用なin vitro小腸モデルの構築と臓器間相互作用の解析

构建用于糖脂代谢研究和器官间相互作用分析的体外小肠模型

• 批准号: 21659184
• 负责人: 吉崎 隆之
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659184/
• 关键词: 小腸モデル; 糖質代謝; 脂質代謝; 臓器間相互作用

本研究は糖・脂質代謝研究に有用な「真に使えるin vitro小腸モデル」の作成とその有用性の検証を目的としており,昨年までに小腸モデル細胞として汎用されているヒト結腸癌由来Caco-2細胞および特殊な多孔質膜上で細胞を生体内に近い立体的な状態で培養できる3次元培養容器を用いて実験モデルを構築した.本年はこの実験モデルがどの程度小腸を模倣できているかを調べた.Apical AccessとBasolateral Accessのグルタミン濃度を測定したところ,コンフルエントに達してから18日程度でApical Accessのグルタミン消費がほとんど起こらなくなることを確認した.一方でグルコース代謝に関してはApical AccessとBasolateral Accessでほとんど差は見られなかった.次にオレイン酸(終濃度0.4mM)とタウロコール酸(終濃度0.5mM)を混ぜ,Apical Accessに添加して脂質負荷を12時間行ったところ,Basolateral Accessにカイロミクロン,VLDL, LDL, HDLなどのリポタンパク質が分泌されることを確認した.以上のように小腸の機能を完全には再現できていないものの,本モデルが脂質代謝研究に有用であることが明らかとなった.次にホスファチジン酸ホスファターゼで脂質代謝調節因子としても働くlipinファミリー(lipin-1, lipin-2, lipin-3)の遺伝子発現変化をリアルタイムPCRを用いて解析したところ,Caco-2の分化にともないlipin-2の発現が上昇することが分かった.また,脂質負荷による実験ではこれらの遺伝子発現量に変化は見られなかった.現在,Caco-2細胞のBasolateral Access側にヒト肝癌由来HepG2細胞を共培養し,Apical Accessに脂質負荷を行った際の脂質代謝関連遺伝子の発現量変化について解析を進めている

In this study, sugar and fat substitute research is useful, and it is really useful to make in vitro cures useful and useful. Last year, the cell culture system was used to detect the origin of the cancer. The Caco-2 cells on the special porous membrane were close to the three-dimensional cell culture container. This year, we are in the middle of the year. This year, we are in the middle of a serious problem. Apical Access, Basolateral Access, temperature, and temperature, One party said that they had to Apical Access the Basolateral Access and that they didn't have to. The temperature (0.4mM), the temperature (0.5mM), the temperature, the temperature, the temperature The above information system is fully available. This information system is useful in the study of fat metabolism. In the second half of the year, we found that there was no significant difference between the two groups (lipin-1, lipin-2, lipin-3). In the second part, we found that there was no significant difference between the two groups (lipin-1, lipin-2, lipin-3). In this paper, we used the method of parsing the PCR to analyze the data, and the Caco-2 to differentiate the data from each other. I don't know, I don't know. Now, Caco-2 cells cause Basolateral Access liver cancer, HepG2 cells are co-cultured, and Apical Access cells are loaded with lipids to increase the amount of lipids in lipids.