权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ケミカルシャペロン療法のための革新的スクリーニング法の開発

化学伴侣疗法创新筛选方法的开发

基本信息

批准号：
21659257
负责人：
難波栄二
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

遺伝性ライソゾーム病の脳病態に対するケミカルシャペロン療法とは、基質競合阻害活性を持つ低分子化合物(ケミカルシャペロン)を細胞内で変異酵素蛋白質に結合させることで、構造的に安定化し、ライソゾームへの輸送を促進することで変異酵素活性を上昇させ治療効果を上げる新しい治療法である。本年度は、昨年度に樹立したルシフェラーゼ発現細胞系(Li et al., 2010)による効率的なシャペロン活性測定法を用い、ヒト変異β-ガラクトシダーゼ酵素蛋白質に対する新規シャペロン化合物を同定した。この化合物は、試験管内熱不安定性に対する抑制効果を示しR201C、R457Q変異などに対し既存のシャペロン化合物NOEVと同等のシャペロン活性を認めた。また、I51TやG438EなどNOEVがシャペロン活性を示さない変異に対しても有効性を示した。今後モデルマウス投与実験により、中枢神経系に対する効果を検討してゆく。一方、試験管内阻害活性アッセイとインシリコ解析による酵素蛋白質との結合予測を組み合わせた、新規シャペロン化合物探索系を確立し、FDA認可化合物ライブラリー中からヒト正常β-ガラクトシダーゼに対し試験管内阻害活性を示す2化合物を同定した。現在、これらの化合物については、培養細胞に対するシャペロン活性について詳細な解析を進めている。また、インシリコ解析を行い、可能物の最適化を行っている。以上の結果は、ライソゾーム病に対するケミカルシャペロン療法の開発のための重要な知見であり、将来的な臨床応用に向けた成果が得られたと考えている。

A new therapeutic method for the treatment of chronic diseases is proposed, in which low molecular weight compounds (LMWs) are used to stabilize and promote the transport of chronic diseases. Cell lines were established in the past year (Li et al., 2010) The activity assay for enzyme activity was used to determine the activity of enzyme protein. These compounds have been shown to inhibit in vitro thermal instability. R201C and R457Q are different from the existing compounds. NOEV has been shown to have similar activity. I51T and G438E are the best examples of how the NOEV can be activated. In the future, the central nervous system will be discussed in detail. A new compound discovery system was established for the determination of enzyme protein binding prediction in the assay tube, and the identification of FDA-approved compounds in the assay tube. Now, this compound is tested in vitro, cultured cells are tested in vitro, and detailed analysis is performed. In the process of analysis, optimization of possible objects is carried out. The above results are important insights into the development of clinical therapy and future clinical applications.