運動器再生医療を目指した多能性幹細胞から間葉系細胞への分化誘導シグナルの探索

寻找诱导多能干细胞分化为肌肉骨骼再生医学的间充质细胞的信号

基本信息

  • 批准号:
    21659347
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.98万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
  • 财政年份:
    2009
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2009 至 2010
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

間葉系マーカーであるPRX1、PRX2の種間で高度に保存されている近位3kbの配列を用いたルシフェラーゼレポーターアッセイにて、NFkBシグナルの主な転写因子であるRELAがPRX1、PRX2をともに強力に活性化し、またCREB/ATFファミリー分子がPRX1プロモーターを、KLFファミリー分子がPRX2プロモーターを、それぞれ選択的に強力に活性化することが判明した。プロモーターのデリーションアッセイにてそれぞれの応答部位を同定した。Prx1については、さらにその応答部位を中心に40bpほどの配列をタンデムに重ねてベーサルプロモーターに繋げ、蛍光蛋白EGFPを接合させることで、強力な蛍光レポーターカセットを作成した。これらをレンチウイルスベースに組み替え、iPS細胞に安定導入することを試みたが成功に至らなかったため、iPS樹立前の体細胞に一旦安定導入してからiPS細胞を樹立した。このiPS細胞はレチノイン酸をベースにした間葉系分化誘導法によって良好な発光を呈したため、この蛍光モニタリングシステムを用いて発現クローニングを行い、複数の間葉系誘導能を持つと予想される候補分子を得た。このうち転写因子p53のファミリー分子については、未分化間葉系細胞の凝集段階において強く発現することが確かめられた。しかしながらこの分子については発現ベクターを作成してウイルスベースで導入してもマウスES細胞やiPS細胞を間葉系に誘導する有効な効果は認められなかった。現在は他の候補分子について発現と機能の両面から解析を行っている。
Leaf is between マ ー カ ー で あ る PRX1, PRX2 の interspecific で highly に save さ れ て い る nearly 3 KB の matched with column を い た ル シ フ ェ ラ ー ゼ レ ポ ー タ ー ア ッ セ イ に て, NFkB シ グ ナ ル の main な planning write factor で あ る RELA が PRX1, PRX2 を と も に powerful に activeness し, ま た after CREB/ATF フ ァ ミ リ ー molecular が PRX1 プ ロ モ ー タ ー を, KLF フ ァ ミ リ ー molecular が PRX2 プ ロ モ ー タ ー を, そ れ ぞ れ sentaku に strong に activeness す る こ と が.at し た. プ ロ モ ー タ ー の デ リ ー シ ョ ン ア ッ セ イ に て そ れ ぞ れ の 応 を a parts with fixed し た. Prx1 に つ い て は, さ ら に そ の 応 answer parts を に centre 40 bp ほ ど の match column を タ ン デ ム に heavy ね て ベ ー サ ル プ ロ モ ー タ ー に 繋 げ, 蛍 light protein EGFP を joint さ せ る こ と で, powerful な 蛍 light レ ポ ー タ ー カ セ ッ ト を made し た. こ れ ら を レ ン チ ウ イ ル ス ベ ー ス に group for え み, iPS cells に settle import す る こ と を try み た が に success to ら な か っ た た め, sets up the former の iPS cells に once settle import し て か ら iPS cells を set し た. こ の iPS cells は レ チ ノ イ ン acid を ベ ー ス に し た leaf is divided between the candidated に よ っ て good な 発 を light show し た た め, こ の 蛍 light モ ニ タ リ ン グ シ ス テ ム を with い て 発 now ク ロ ー ニ ン グ を い, leaf is the induced を can hold between the plural の つ と to think さ れ た を る alternate molecules. こ の う ち planning write factor p53 の フ ァ ミ リ ー molecular に つ い て は の, undifferentiated mesenchymal cells agglutinate Duan Jie に お い て strong く 発 now す る こ と が か indeed め ら れ た. し か し な が ら こ の molecular に つ い て は 発 now ベ ク タ ー を made し て ウ イ ル ス ベ ー ス で import し て も マ ウ ス ES cells や iPS cells among を leaf に induced す る have sharper な unseen fruit は recognize め ら れ な か っ た. Now, <s:1> his <s:1> candidate に, に, て, て is currently showing と function <e:1> sides ら analysis を line って, る る.

项目成果

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专利数量(0)
Wear resistance of artificial hip joints with poly(2-methacryloyloxyethyl phosphorylcholine) grafted polyethylene: Comparisons with the effect of polyethylene cross-linking and ceramic femoral heads
  • DOI:
    10.1016/j.biomaterials.2009.02.020
  • 发表时间:
    2009-06-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    14
  • 作者:
    Moro, Toru;Kawaguchi, Hiroshi;Takatori, Yoshio
  • 通讯作者:
    Takatori, Yoshio
Screening of Chondrogenic Factors With a Real-Time Fluorescence-Monitoring Cell Line ATDC5-C2ER Identification of Sorting Nexin 19 as a Novel Factor
  • DOI:
    10.1002/art.24878
  • 发表时间:
    2009-11-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kan, Akinori;Ikeda, Toshiyuki;Kawaguchi, Hiroshi
  • 通讯作者:
    Kawaguchi, Hiroshi
The prevention of peritendinous adhesions by a phospholipid polymer hydrogel formed in situ by spontaneous intermolecular interactions
  • DOI:
    10.1016/j.biomaterials.2010.01.100
  • 发表时间:
    2010-05-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    14
  • 作者:
    Ishiyama, Noriyuki;Moro, Toru;Kawaguchi, Hiroshi
  • 通讯作者:
    Kawaguchi, Hiroshi
Acute Cervical Spinal Cord Injury Complicated by Preexisting Ossification of the Posterior Longitudinal Ligament A Multicenter Study
  • DOI:
    10.1097/brs.0b013e3181f49718
  • 发表时间:
    2011-08-15
  • 期刊:
  • 影响因子:
    3
  • 作者:
    Chikuda, Hirotaka;Seichi, Atsushi;Nakamura, Kozo
  • 通讯作者:
    Nakamura, Kozo
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  • DOI:
    10.1002/jcb.22454
  • 发表时间:
    2010-03-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    4
  • 作者:
    Shinoda, Yusuke;Kawaguchi, Hiroshi;Ogata, Naoshi
  • 通讯作者:
    Ogata, Naoshi
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  • 通讯作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
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    0
  • 作者:
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変形性股関節症と職業との関連
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    飯高 世子;村木 重之;岡 敬之;堀井 千彬;田中 栄;川口 浩;中村 耕三;阿久根 徹;吉村 典子
  • 通讯作者:
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    2011
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    森岡 和仁;早川 謙太郎;岡崎 廉太郎;川口 浩;中村 耕三;赤居 正美;緒方 徹
  • 通讯作者:
    緒方 徹
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    阿久根 徹;村木 重之;岡 敬之;田中 栄;川口 浩;中村 耕三;吉村 典子
  • 通讯作者:
    吉村 典子

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