脂肪分化能を指標とした間葉系幹細胞の非対称性分裂機構の解明

以脂肪分化潜能为指标阐明间充质干细胞的不对称分裂机制

• 批准号: 21659352
• 负责人: 青山 朋樹
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659352/
• 关键词: 四肢再建学

本研究においては分化過程におけるCD106(VCAM-1)表面抗原発現と非対称性分裂機構という間葉系幹細胞の細胞生物学的性質の解明を主目的とした。申請時には脂肪分化におけるCD106発現との関連を主目的として行ったが、初年度の成果からIn vivoの実験において関節軟骨最表層の細胞がCD106を発現し、脂肪と同様に非対称分裂過程を経ながら成熟した軟骨細胞に分化することが明らかになった。今年度に明らかになった成果は以下の通りである。・ 関節軟骨最表層細胞はCD106を発現している。・ 同じ関節軟骨最表層細胞はCD90, CD271などの間葉系幹細胞の表面光源マーカーを発現している。・ これらは深層の細胞になるにつれて発現しなくなる。・ DiIで表面の細胞を染色しIn Vivoで経過を観察した結果、継時的に深層の細胞が染色されることから、表層の細胞が分裂、分化して深層の細胞構築を行っていることが明らかになった。以上の結果から関節軟骨にも関節軟骨幹細胞と呼ぶべき幹細胞の存在が明らかになり、今後の関節軟骨の生物学的特性を明らかにするうえで重要な知見を得ることができた。本研究のlimitationは以下の通りで、今後以下の展開を考えている。・ 免疫染色光学顕微鏡観察では関節軟骨の細胞境界が明らかではないため、免疫電子顕微鏡観察を行う。・ 関節軟骨最表層細胞を用いたin vitroの実験ができていない。→軟骨最表層細胞のみを特異的に抽出し(この手法について酵素処理にて行う方法を確立)、in vitroで増殖能、分化能、CD106の発現解析を実施する。

The aim of this study is to elucidate the cellular biological properties of mesenchymal stem cells during the differentiation process of CD106 (VCAM-1) surface antigen and asymmetric division mechanism. The main purpose of this study is to investigate the relationship between CD106 expression and adipocyte differentiation. The results of this study include: In vivo, CD106 expression in the outermost cells of articular cartilage, adipocyte differentiation, and chondrocyte maturation. This year's achievements are as follows: CD106 is found in the outermost layer of articular cartilage. The surface light of mesenchymal stem cells (MSCs) with CD90, CD271 and CD271 in the outermost layer of articular cartilage appeared. This is the first time that a deep cell has been discovered. DiI staining of cells on the surface In Vivo staining of cells on the surface in Vivo The above results show that the existence of articular cartilage stem cells and the biological characteristics of articular cartilage in the future are important. The limitation of this study is the following: Immunostaining, optical microscopy, electron microscopy, and immunostaining of articular cartilage cells. The most superficial cells of articular cartilage are used in vitro.→ Specific extraction of the outermost cells of cartilage (the method of enzyme treatment was established), in vitro proliferation, differentiation, CD106 expression analysis.

项目成果

Mesenchymal stem cells cultured under hypoxia escape from senescence via down-regulation of p16 and extracellular signal regulated kinase

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2009.12.096
• 发表时间: 2010-01-15
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Jin, Yonghui;Kato, Tomohisa;Toguchida, Junya
• 通讯作者: Toguchida, Junya

Histone Modifiers, YY1 and p300, Regulate the Expression of Cartilage-specific Gene, Chondromodulin-I, in Mesenchymal Stem Cells

• DOI: 10.1074/jbc.m110.116319
• 发表时间: 2010-09-24
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Aoyama, Tomoki;Okamoto, Takeshi;Toguchida, Junya
• 通讯作者: Toguchida, Junya

大腿骨頭無腐性壊死症に対する自己骨髄間葉系幹細胞を用いた臨床試験:細胞調製の安全性管理体制に関して

自体骨髓间充质干细胞治疗股骨头非脓毒性坏死的临床试验：关于细胞制备的安全管理体系

• 发表时间: 2010
• 期刊: 再生医療
• 作者: 鄭偉;本望修;原田邦明;鈴木順平;宝金清博;Okita Yoshiko;Kinoshita Manabu;Goto Yuko;Kinoshita Manabu;Chiba Yasunori;Kinoshita Manabu;Chiba Yasunori;Rabo Carter Santos;Arita Hideyuki;Manabu Kinoshita;Yoshiko Okita;Aoyama T.;Manabu Kinoshita;青山朋樹;Manabu Kinoshita;青山朋樹
• 通讯作者: 青山朋樹

難治性骨壊死疾患に対する間葉系幹細胞を用いた臨床試験

间充质干细胞治疗难治性骨坏死疾病的临床试验

• 发表时间: 2010
• 作者: Muraki S;Oka H;Akune T;En-yo Y;Yoshida M;Nakamura K;Kawaguchi H;Yoshimura N;Manabu Kin22shita;青山朋樹
• 通讯作者: 青山朋樹

間葉系幹細胞を用いた臨床応用

间充质干细胞的临床应用

• 发表时间: 2010
• 作者: Yoshimura N;Muraki S;Oka H;Kawaguchi H;Nakamura K;Akune T;青山朋樹
• 通讯作者: 青山朋樹