Visualization analysis of neurotransmission and exocytosis by using novel fluorescent protein and laser optics technology

利用新型荧光蛋白和激光光学技术对神经传递和胞吐作用进行可视化分析

• 批准号: 22300131
• 负责人: NEMOTO Tomomi
• 金额: $ 11.48万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22300131/
• 关键词: 2光子顕微鏡; 分泌; 蛍光タンパク質; SNARE; 光脳科学; 非線形光学; 開口放出; イメージング; 2光子顕微鏡強; 破骨細胞; SNAREタンパク質

We have developed novel visualization analysis techniques for neurotransmission and exocytosis, and constructed “in vivo” optical imaging methods to advance for elucidation of the molecular basis. We generated fluorescently tagged SNARE proteins, VAMP-Sirius by using a novel fluorescent protein Sirius in order to visualize dynamics of acid vesicles in an osteoclast model. A novel FRET Ca^<2+> sensor, Cameleon-nano protein, visualized Ca^<2+>-dependent exocyosis in pancreatic acinar cells, as well as Ca^<2+> dynamics in neurons in cerebellum. Furthermore, we successfully observed hippocampal neurons in deeper layers in live mouse brains.

我们已经开发了新的可视化分析技术的神经传递和胞吐作用，并构建了“在体内”的光学成像方法，以进一步阐明的分子基础。我们产生荧光标记的陷阱蛋白，VAMP-Sirius通过使用一种新的荧光蛋白天狼星，以可视化的动力学的破骨细胞模型中的酸囊泡。一种新的FRET Ca^2+传感器，Cameleon-纳米蛋白，可视化了胰腺腺泡细胞中Ca^2+依赖性胞吐，以及小脑神经元中的Ca^2+动力学。此外，我们成功地观察到海马神经元在更深层次的活小鼠大脑。

项目成果

Enhancement of lateral resolution of confocal and two-photon laser scanning microscopy by using higher-order radially polarized laser beams

使用高阶径向偏振激光束增强共焦和双光子激光扫描显微镜的横向分辨率

• 发表时间: 2010
• 作者: T. Hibi;Y Kozawa;A. Sato;H. Yokoyama;S. Sato;T. Nemoto
• 通讯作者: T. Nemoto

GABA regulates the multidirectional tangential migration of GABAergic interneurons in living neonatal mice.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0027048
• 发表时间: 2011
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Inada H;Watanabe M;Uchida T;Ishibashi H;Wake H;Nemoto T;Yanagawa Y;Fukuda A;Nabekura J
• 通讯作者: Nabekura J

Rapl controls lymphocyte adhesion cascade and interstitial migration within lymph nodes in a RAPL-dependent and -independent manner.

Rapl 以依赖和不依赖 RAPL 的方式控制淋巴结内的淋巴细胞粘附级联和间质迁移。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Blood
• 影响因子: 20.3
• 作者: Tomomi Nemoto

新しいレーザー、光学技術を用いた多光子顕微鏡

使用新激光和光学技术的多光子显微镜

• 发表时间: 2013
• 作者: 金井孝夫;池郁生;根本知己
• 通讯作者: 根本知己

生体深部の二光子イメージング

体内深处的双光子成像

• 发表时间: 2012
• 期刊: 血管医学
• 作者: Funabiki K;Ashida G;Konishi M;佐藤宗太;根本知己
• 通讯作者: 根本知己