Development of New Methods for Protein Chemical Modification

蛋白质化学修饰新方法的开发

• 批准号: 22350073
• 负责人: OJIDA Akio
• 金额: $ 11.56万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22350073/
• 关键词: タンパク質; 蛍光プローブ、ラベル化; バイオイメージング; ペプチドデザイン; 蛍光プローブ; ラベル化; GPCR; 環境応答性色素

In this research, we have attempted to develop several new chemical methods for protein modification. First, we have developed the covalent protein method using the complementary recognition pair of oligo-His tag and Ni(II)-NTA probe. This labeling method was successfully applied to the labeling of the tag-fused proteins in living cells. Second, we have achieved the design of highly reactive tag-probe pair comprising a-helix type oligo-Asp tag and Zn(II)-DpaTyr probe. This pair showed the higher protein labeling selectivity compared to the previously developed method, validating the our design strategy of the reactive tag-probe pair. Third, we have found the new fluorescent dye for protein modification This fluorescent dye displayed a unique dual-emission change depending on its hydration state, which we expect would be valuable fluorohore to develop protein-based fluorescence biosensors

在这项研究中，我们试图开发几种新的蛋白质修饰的化学方法。首先，我们建立了利用寡组组标签和Ni(II)-NTA探针的互补识别对的共价蛋白质方法。这种标记方法被成功地应用于活细胞中标签融合蛋白的标记。其次，我们实现了高反应性的标签-探针对的设计，其中包括-螺旋型寡聚天冬氨酸标签和锌(II)-DpaTyr探针。与先前开发的方法相比，这一对显示了更高的蛋白质标记选择性，验证了我们的反应性标签-探针对的设计策略。第三，我们发现了用于蛋白质修饰的新型荧光染料这种荧光染料根据其水合状态表现出独特的双发射变化，这将是开发基于蛋白质的荧光生物传感器的有价值的荧光载体

项目成果

Selective Covalent Labeling of Tag-Fused GPCR Proteins on Live Cell Surface with a Synthetic Probe for Their Functional Analysis

• DOI: 10.1021/ja910703v
• 发表时间: 2010-07-14
• 期刊: JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
• 影响因子: 15
• 作者: Nonaka, Hiroshi;Fujishima, Sho-hei;Hamachi, Itaru
• 通讯作者: Hamachi, Itaru

小分子プローブによるタンパク質ラベル化法

使用小分子探针的蛋白质标记方法

• 发表时间: 2011
• 期刊: ぶんせき
• 作者: H. Yokoi;X. Zhang;S. Suzuki;M. Kozaki;K. Okada;T. Ishida;王子田 彰夫
• 通讯作者: 王子田 彰夫

タンパク質機能化のためのケミカルバイオロジー研究

蛋白质功能化的化学生物学研究

• 发表时间: 2012
• 作者: 小出和也;石田尚行;大神田淳子;王子田 彰夫
• 通讯作者: 王子田 彰夫

高反応性ペプチドタグデザインに基づいたタンパク質特異的ラベル化法の開発(1)

基于高反应性肽标签设计的蛋白质特异性标记方法的开发（1）

• 发表时间: 2013
• 作者: 城戸宗継;田畑栄一;浜地格;王子田彰夫
• 通讯作者: 王子田彰夫

リガンド指向型イミダゾール-N-カルボキシエステルによる蛋白質選択的ラベル化

使用配体导向的咪唑-N-羧酸酯选择性蛋白质标记

• 发表时间: 2010
• 作者: 安井亮介;藤島祥平;築地真也;堤浩;王子田彰夫;浜地格
• 通讯作者: 浜地格