脊髄虚血による対麻痺に対するピタバスタチンの抑制効果とそのメカニズムの検討

匹伐他汀对脊髓缺血性截瘫的抑制作用及其机制研究

• 批准号: 22591545
• 负责人: 中田 達広
• 金额: $ 1.58万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22591545/
• 关键词: 脊髄虚血再灌流傷害; 術後対麻痺; 胸部大動脈; ミクログリア; マクロファージ

【背景】大脳領域では虚血再灌流後に、虚血部位に活性化microglia/macrophageが集積する事が知られている。今回我々は、脊髄虚血再灌流障害発症後のこれらの細胞の役割について検討した。【方法】雄Witar ratを、下行大動脈を13分遮断再灌流して虚血再灌流対麻痺モデルを作成し、下肢運動の神経学的評価を軽症、中等症、重症に分けて検討した。脊髄組織の頸髄、腰髄を採取し、免疫蛍光染色、real-time RT-PCRにて検討した。さらに、GFPラット骨髄移植ラットを用い、上記実験を施行した。【結果】GFP骨髄移植ラット実験において、虚血再灌流後の亜急性期の主体免疫細胞がresident microglia(RMG)ではなく、bone marrow-derived macrophage (BMDM)であることが示された。再灌流2日後、重症群ではBBBの破綻が著明であった。再灌流7日後、Sham群は、全部位RMGのみが観察された。軽症群では、RMGとBMDMが混在するように観察された。中等症群下部脊髄では、ほとんどのIbal^+細胞は、樹状活性化BMDMであった。一部の細胞はsynaptic strippingが観察された。重症群では、中等症群に比べ、大量のアメーバ状BMDMが集積していた。虚血再灌流7日後の抗TNFα, IL-1β, iNOS, CD68, IGF-1抗体等を用いた二重蛍光免疫染色により、これらの炎症性サイトカイン、iNOSは中等症群以下ではBMDMにほとんど発現しなかった。それに対し、重症群でほぼ全BMDMがこれらを発現していた。中等症樹状BMDMの一部にIGF-1の発現を認め、重症群では全アメーバ状BMDMでこの発現を認めた。real time RT-PCRでは、重症群はPCNAのmRNAの上昇を認め、活発に増殖していることが示された。【考察】脊髄虚血病理像は、不全麻痺症例では重症度とともに樹状BMDM浸潤数が増え活性化する。完全麻痺例では、BBBの破綻とともにアメーバ状BMDMの浸潤が大量に生じ、両者の病理像は大きく異なる。不全麻痺症例では、樹状BMDMによる神経細胞保護の動きが見られる。重症例ではアメーバ状BMDMは貪食と共に、神経再生に関与している可能性がある。

Background: The accumulation of activated microglia/macrophage after reperfusion in large areas of deficient blood Now, after the onset of spinal deficiency reperfusion injury, the cells in the spinal cord were removed from the spinal cord. [Methods] Male Witar rat, descending artery, 13-minute interruption of reperfusion, hypoperfusion, paralysis, neurologic evaluation of lower limb movement, moderate and severe symptoms. The cervical and lumbar spine tissues were collected, immunostained, and real-time RT-PCR examined. In addition, GFP can be used for bone grafting. [Results] GFP bone marrow transplantation was successful, and the host immune cells in the acute phase after reperfusion were identified as resident microglia(RMG) and bone marrow-derived macrophage (BMDM). After reperfusion for 2 days, severe group of BBB defects appeared. After 7 days of reperfusion, Sham group and all RMG were detected. The symptoms are mixed with RMG and BMDM. The lower part of the middle syndrome group is called Ibal^+ cell, dendritic active BMDM. Some of the cells are synaptic stripping. Severe group, moderate group, a large number of BMDM accumulation After 7 days of reperfusion, anti-TNF α, IL-1β, iNOS, CD68, IGF-1 antibodies were detected by double fluorescence immunostaining. All BMDM cases were found in severe cases. The expression of IGF-1 in one part of tree-like BMDM in moderate and severe cases was detected. Real time RT-PCR was used to detect PCNA mRNA up-regulation in severe cases. [Investigation] Pathological images of spinal deficiency and incomplete paralysis increased the number of tree-like BMDM infiltrations. Complete paralysis cases, BBB defects, BMDM infiltration, a large number of diseases, the pathological image of the disease is very different In cases of incomplete paralysis, neuroprotective activity is observed in tree-like BMDM. In severe cases, BMDM is associated with bulimia and neurogenesis.

项目成果

脊髄虚血モデルにおけるマイクログリア/マクロファージの反応と起源に関する検討

检查脊髓缺血模型中小胶质细胞/巨噬细胞的反应和起源

• 发表时间: 2011
• 作者: Shinaoka;A.;et al.;Hirata Y;Hirata Y;Kurobe H;Fujimoto E;中田達広
• 通讯作者: 中田達広