Evaluation of phagocytic function and analysis of antigen-processing mechanism of microglia in ALS

ALS小胶质细胞吞噬功能评价及抗原加工机制分析

• 批准号: 22790834
• 负责人: YAMASHITA Hirofumi
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22790834/
• 关键词: 神経変性疾患; 筋萎縮性側索硬化症; マイクログリア; 貪食; 筋委縮性側索硬化症; ミクログリア

First, we evaluatebyimmunohistochemistry the microglialbehaviorinspinalcord lesion of ALS mouse model. We found microglia uptaked, or surrounded the SOD1 aggregates in the spinal cord of the SOD1G85R transgenic mouse at symptomatic stage. Therefore wehy pothes ized that these microglia reflected the state of"frustrated phagocytosis"when microglia could not digest SOD1 aggregates fully. Next, in order to quantify th uptake of aggregates into microglia, we establishedthe system tomeasure the fluorescent beads incorporated into the phagocytes Using the system, we compared the SOD1G85R expressing-microglia with wild-type ones, but no difference was found. We confirmedtheaggregates ofthe SOD1WTor G85Rfibrilswere incorpotrated into microglia when they were added into medium. Then we made the mutant SOD1 aggregate-mimics by adsorb SOD1G85Rinto beads andexamined the ability ofwild-type orSOD1G85R-expressing microglia t incorporate them, butno difference was found.

首先，我们用免疫组织化学方法观察ALS小鼠脊髓损伤后小胶质细胞的行为。我们发现症状期SOD1G85R转基因小鼠脊髓中的小胶质细胞摄取或包围SOD1聚集体。因此，我们认为这些小胶质细胞反映了当小胶质细胞不能完全消化SOD 1聚集体时的“吞噬功能受挫“状态。然后，为了定量小胶质细胞对聚集体的摄取，我们建立了吞噬细胞荧光珠掺入量的测定系统，利用该系统，我们将表达SOD 1G85 R的小胶质细胞与野生型小胶质细胞进行了比较，但没有发现差异，我们证实了SOD 1WT或G85 R纤维的聚集体在加入到培养基中时被掺入到小胶质细胞中。然后，我们通过将SOD1G85R吸附到珠粒中来制备突变的SOD1聚集体模拟物，并检测野生型或表达SOD1G85R的小胶质细胞整合它们的能力，但没有发现差异。

项目成果

ALS-SOD1の発症機序

ALS-SOD1 的发病机制

• 发表时间: 2011
• 期刊: Clinical Neuroscience
• 作者: 山下博史;山中宏二
• 通讯作者: 山中宏二

変異SOD1発現マイクログリアにおける貪食機能の評価

表达突变型 SOD1 的小胶质细胞吞噬功能的评估

• 发表时间: 2010
• 作者: 山下博史;他
• 通讯作者: 他

ALS病態におけるグリアの役割

神经胶质细胞在 ALS 病理学中的作用

• 发表时间: 2012
• 期刊: 脳21
• 作者: 山下博史;山中宏二
• 通讯作者: 山中宏二

細胞特異的トランスクリプトームを用い た、弧発性ALS患者脊髄のDNAマイクロアレ イによる解析

使用细胞特异性转录组对散发性 ALS 患者脊髓进行 DNA 微阵列分析

• 发表时间: 2012
• 作者: 山下博史;藤森典子;片岡礼音;井口洋平; 熱田直樹;田中章景;祖父江元;山中宏二
• 通讯作者: 山中宏二