Claudin を利用した非侵襲性投与ワクチンの開発

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感染症対策は少子高齢化が顕著に進んでいる我が国にとって最重要課題である。現在汎用されている注射型ワクチンは全身免疫は賦活できるものの、粘膜免疫賦活化に乏しく、侵襲性投与であることが問題である。一方で、粘膜ワクチンは全身・粘膜免疫の双方を誘導可能であり、非侵襲性投与が可能であることからも、理想的な感染症対策であると期待されている。しかしながら、抗原を単に粘膜面に投与するだけでは免疫が誘導されず、多くの免疫担当細胞が集積する粘膜免疫組織へ効率よく抗原を送達する必要がある。申請者は抗原送達に関して粘膜免疫組織に高発現するclaudin-4(CL-4)に着目し、その結合分子として知られるウエルシュ菌毒素C末断片(C-CPE)を用いた粘膜ワクチン開発が可能であることを明らかにした。これまでの検証は抗原性の高いモデル抗原:卵白アルブミンを用いてのものであるため、本年度では感染症に対する粘膜ワクチン効果に焦点を絞り検証を行った。感染症関連抗原としてはすべての肺炎球菌に共通して発現しているPspA(Pneumococcal surface protein A)に着目し、CL-4を標的とした感染症粘膜ワクチン開発を目指し、検証を行った。まず、PspAとC-CPEの融合タンパク質を作製し、CL発現バキュロウィルスを用いたELISAによりそのCL-4結合性を検証した。その結果、PspA-C-CPEはCL-4指向性を有していた。続いて、PspA-C-CPEによる免疫賦活化効果を検証するために、マウスにPspA-C-CPEを経鼻投与することによりPspA特異的抗体が得られるか検証した。その結果、PspA単独群に比してPspA-C-CPEでは有意に高い血清IgGおよび粘膜IgAの誘導が認められた。以上の知見はC-CPEを利用し、粘膜免疫組織に高発現しているCL-4を標的とした感染症粘膜ワクチン開発の可能性を示している。今後は感染症モデルマウスを用い、PspA-C-CPEによる肺炎球菌感染予防効果を中心に検証を行い、CL-4を標的とした非侵襲性投与ワクチン開発を目指していく。