乳酸菌をキャリアとする粘膜ワクチン系開発に関する研究

以乳酸菌为载体的粘膜疫苗系统开发研究

• 批准号: 22K07071
• 负责人: 高橋 圭太
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Gifu Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07071/
• 关键词: ワクチン; アジュバント; 乳酸菌; bacterium-like particles; Citrobacter rodetnium; 粘膜ワクチン; 細菌様粒子; DNAワクチン

本研究は、従来の注射ワクチンでの誘導が難しい粘膜免疫を誘導できるワクチン系の構築を目指した研究である。具体的には、ヒトに対する安全性が高いと考えられる乳酸菌をベクター/アジュバントとして用いる2種類の粘膜ワクチン系－1) DNAワクチン系、2) 乳酸菌由来細菌様粒子(BLP)アジュバントを用いた組換え蛋白ワクチン系－の構築を進めている。令和4年度は、経口投与と経鼻投与で誘導される抗原特異的抗体価等の比較により、投与経路の違いがこれらのワクチン系の免疫原性に及ぼす影響を検討した。1)DNAワクチン系：真核細胞内でのみEGFPを発現するプラスミドを導入した乳酸菌NZ9000株をC57BL/6マウスに経口または経鼻投与した場合のEGFP特異的抗体価を比較した。その結果、経鼻投与の場合のみEGFP特異的血中IgG、気管支肺胞洗浄液IgA、鼻腔洗浄液IgAの有意な上昇がみられた。経鼻投与群の血中IgG抗体価は、精製プラスミドの筋注群（ポジティブコントロール）の抗体価と同程度だった。2)BLPアジュバントを用いた組換え蛋白ワクチン系：マウスの病原細菌であるCitrobacter rodentiumの病原因子（Tir）をモデル抗原として使用した。TirをBLPに結合させたBLP-Tirは、経鼻投与の場合に経口投与の約1,000倍の免疫原性を示し、全身性IgGに加えて、呼吸器および腸管粘膜のIgA抗体価の上昇を誘導した。抗原/BLPの体内動態解析および粘膜関連リンパ組織のトランスクリプトーム解析の結果、投与経路による免疫原性の違いは、粘膜関連リンパ組織への抗原/BLPの到達量の違いと、それに伴う免疫関連遺伝子群の発現の強弱に起因することが明らかとなった。また、様々な乳酸菌種から調製したBLPのアジュバント効果を比較し、アジュバント効果の高いBLP、安全性の高いBLPをそれぞれ同定した。

This study is aimed at the induction of mucosal immunity by injection and the construction of mucosal immunity. The specific safety of lactic acid bacteria is relatively high. 2 kinds of mucosal bacteria are used. 1) DNA bacteria are used. 2) lactic acid bacteria-derived bacterial particles (BLP) are used. To investigate the immunogenicity of antigen-specific antibodies and their effects on antigen-specific antibodies induced by oral and nasal administration in 2004 and 2005. 1) Comparison of EGFP expression in eukaryotic organisms with EGFP specific antibodies introduced into Lactobacillus NZ9000 strain C57BL/6. The results showed that EGFP specific IgG, IgA in pulmonary lavage fluid and IgA in nasal lavage fluid increased significantly in different situations. IgG antibodies in the serum were purified and purified to the same extent as those in the serum. 2)BLP is a pathogenic bacterium, Citrobacter rodentium and its pathogenic factor (Tir). Tir BLP binding to BLP-Tir induced an approximately 1,000-fold increase in immunogenicity when administered orally, systemic IgG, respiratory tract, and intestinal mucosa. The results of in vivo dynamic analysis of antigen/BLP and mucosal association with tissue status analysis, immunogenicity of administration and pathway, arrival of antigen/BLP in mucosal association with tissue status, and occurrence of associated immune association with antigen subset are discussed. The results of BLP and BLP were compared, and the results of BLP and BLP safety were compared.

项目成果

Effect of the administration route of the adjuvanticity of bacterium-like particles (BLPs) derived from Lactococcus lactis

给药途径对乳酸乳球菌类细菌颗粒（BLP）佐剂作用的影响

• 发表时间: 2023
• 作者: Sudo H;Tokunoh N;Tsujii A;Kawashima S;Hayakawa Y;Fukushima H;Takahashi K;Koshizuka T;Inoue N.
• 通讯作者: Inoue N.

The adjuvant effect of bacterium-like particles depends on the route of administration.

• DOI: 10.3389/fimmu.2023.1082273
• 发表时间: 2023
• 期刊: FRONTIERS IN IMMUNOLOGY
• 影响因子: 7.3
• 作者: Sudo, Haruka;Tokunoh, Nagisa;Tsujii, Ayato;Kawashima, Sarana;Hayakawa, Yuta;Fukushima, Hiroki;Takahashi, Keita;Koshizuka, Tetsuo;Inoue, Naoki
• 通讯作者: Inoue, Naoki

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