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イネ助細胞が制御する受精メカニズムの解明

阐明水稻协同细胞控制的受精机制

基本信息

批准号：
11J05439
负责人：
高梨秀樹
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J05439/
关键词：
イネ花粉管生殖助細胞

项目摘要

イネ花粉管誘引物質を同定するためには,遺伝子発現情報をもとに候補遺伝子の選抜を行う必要がある.そこでまず,筆者らがこれまでに得たマイクロアレイによるイネ助細胞の遺伝子発現プロファイル(Ohnishi and Takanashi et al.2011)の結果から,助細胞で高発現し,かつ分泌性タンパク質をコードする複数の遺伝子を候補として選抜した.また,マイクロアレイチップ上に該当遺伝子のプローブが存在しない可能性も考慮し,並行して行っている次世代シーケンサーによるイネ助細胞のトランスクリプトーム解析の結果も用いて選抜作業を行った.選抜した候補遺伝子についてはノックアウト株が存在しなかったため,それが花粉管誘引物質をコードしているか否かを判別するためには遺伝子ノックダウンによる機能解析が必須である.本研究ではpANDAベクター(Miki et al.2005)を用いてRNAiによる遺伝子ノックダウン系統の作出を計画している.将来的にRNAiが機能している胚嚢をGUS染色により判別する必要があること等を考慮し,後の実験をスムーズに行うため現在pANDAベクターの改変を行った.花粉管誘引物質の同定には,花粉管が胚珠からの誘引シグナルにどのように応答するかを生きた状態で観察できるsemi in vitro重複受精系を用いた,候補物質の花粉管誘引活性解析が必須である.しかしながら,イネ花粉管は一般的に用いられる花粉管伸長培地上では伸長が芳しくないことが明らかになったため,イネ花粉管に最適化した花粉管伸長培地の作製を試みた.培地組成の濃度検討を行ったところ,ホウ酸濃度を20μg/mlに上昇させ,スクロースの半量をトレハロースに置き換えた培地ではイネ花粉管の伸長が良好になることが明らかになった.

Pollen tube attractors are identified, and information on pollen tube development is identified. In this paper, the author found that the helper cell's gene expression was higher (Ohnishi and Takanashi et al.2011), and the secretory protein was higher (Ohnishi and Takanashi et al.2011). In addition, the possibility of the existence of the gene in the next generation is considered, and the results of the analysis of the helper cells in the next generation are carried out in parallel. The function analysis of pollen tube attractant is necessary to determine the existence of pollen tube attractant. In this study, we proposed a new approach to the development of pANDA (Miki et al.2005) for RNAi detection. In the future, RNAi functions will be determined by GUS staining. It is necessary to consider such factors, and then to implement them in the future. Pollen tube attractant is a candidate for pollen tube attractant activity analysis. Pollen tube elongation is the most important part of pollen tube growth. When the concentration of the culture medium is 20μg/ml, the growth of pollen tube is good.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

DCL2 is highly expressed in the egg cell in both rice and Arabidopsis

DCL2 在水稻和拟南芥的卵细胞中高表达

DOI：
发表时间：
2011
期刊：
Plant Signaling & Behavior
影响因子：
2.9
作者：
大西孝幸;高梨秀樹(co-first);高梨秀樹
通讯作者：
高梨秀樹

Distinct Gene Expression Profiles in Egg and Synergid Cells of Rice as Revealed by Cell Type-Specific Microarrays

DOI：
10.1104/pp.110.167502
发表时间：
2011-02-01
期刊：
PLANT PHYSIOLOGY
影响因子：
7.4
作者：
Ohnishi, Takayuki;Takanashi, Hideki;Tsutsumi, Nobuhiro
通讯作者：
Tsutsumi, Nobuhiro

次世代シーケンサーを用いたイネ雌性配偶体構成細胞のトランスクリプトーム解析

使用下一代测序对水稻雌配子体细胞进行转录组分析

DOI：
发表时间：
2012
期刊：
影响因子：
0
作者：
大西孝幸;高梨秀樹(co-first);高梨秀樹;高梨秀樹
通讯作者：
高梨秀樹

DOI：
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作者：
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海老勇吾;早川郷;高梨秀樹;吉田薫;吉田薫・坂井博明・石綱史子・矢頭治・森脇太郎・池本夕佳;楠麟太郎・田頭裕介・吉田薫;塩﨑麻由・粟飯原ひとみ・楠田弘毅・吉田薫;齊藤友美・田頭裕介・吉田薫;早川郷・森下直紀・北村嘉崇・吉田薫;田頭祐介・清水友恵・矢頭治・吉田薫;田頭祐介・清水友恵・矢頭治・吉田薫
通讯作者：
田頭祐介・清水友恵・矢頭治・吉田薫