心臓特異的コンディショナルターゲティングによるRAMP2の病態生理学的意義の解明

通过心脏特异性条件靶向阐明 RAMP2 的病理生理学意义

• 批准号: 11J10361
• 负责人: 吉沢 隆浩
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J10361/
• 关键词: アドレノメデュリン; RAMP2; 遺伝子組換マウス; 心不全; 心筋細胞; ミトコンドリア; RAMP; 心臓

アドレノメデュリン(AM)は全身で産生される多機能ペプチドである。AMホモノックアウトマウス(AM-/-)では、心血管系の発生異常により胎生致死となる。AM受容体の活性や特異性はRAMPという膜タンパクが調節している。我々は、RAMPのサブアイソフォームの内、RAMP2ホモノックアウトマウスのみがAM-/-同様に胎生致死になる事を報告している。本研究では、薬剤誘導型心筋細胞特異的RAMP2ノックアウトマウス(C-RAMP2-/-)を独自に樹立し、従来胎生致死となるために不可能であった成体の心臓における詳細な解析を行った。前年度は、C-RAMP2-/-で心不全の自然発症を認め、さらに発症初期から心筋ミトコンドリアに異常を認める事を明らかにした。平成24年度は、C-RAMP2-/-における心不全発症メカニズムの検討と治療実験を実施した。経時的な遺伝子発現の変化をリアルタイムPCRにより検討したところ、C-RAMP2-/-の心臓ではミトコンドリア制御因子PGC-1αの遺伝子発現変動が、心不全関連因子の変動に先行して認められた。ウエスタンブロットでは、PGC-1の制御に関わることが報告されているCREBのリン酸化低下が認められた。C-RAMP2-/-におけるCREB制御機構を明らかとするために、AM-RAMP2系の下流シグナルを検討したところ、細胞内cAMPの減少や、AMの下流シグナル分子のリン酸化低下が認められた。また、フォルスコリン投与により細胞内cAMPを増加させたところ、C-RAMP2-/-の心不全に改善が認められた。同様にC-RAMP2-/-の初代培養心筋細胞にフォルスコリンを添加したところ、ミトコンドリア膜電位などに改善を認めた。以上の結果から、AM-RAMP2系は心筋ミトコンドリアの機能維持・制御を介して心臓の恒常性維持に重要であることが明らかとなった。

Youdaoplaceholder0 される (AM) で The whole body で produces される multifunctional ペプチドである. AMホモノッ アウト アウト ウス ウス(AM-/-)で で, abnormalities in the cardiovascular system によ fetal death となる. AM acceptor <s:1> activity や specificity <s:1> RAMPと う う membrane タ <s:1> パ が が が regulation が て る る る る る る I 々 は, RAMP の サ ブ ア イ ソ フ ォ ー ム の, RAMP2 ホ モ ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の み が AM - / - with others に viviparous death に な る matter を report し て い る. This study で は, 薬 tonic induced core muscle cells specific RAMP2 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス (C - RAMP2 - / -) を に alone し, 従 to viviparous death と な る た め に impossible で あ っ た adult の heart viscera に お け る detailed analytical line を っ な た. Before the annual は, C - RAMP2 - / - で heart insufficiency の natural 発 disease を recognize め, さ ら に 発 disease early か ら heart muscle ミ ト コ ン ド リ ア に abnormal を recognize め る matter を Ming ら か に し た. In the 24th year of the Heisei reign, <s:1>, C-RAMP2-/-における cardiac insufficiency メカニズム メカニズム 検 検 research on と treatment experience を actual shi た た. When 経 な of 伝 son 発 の now - the を リ ア ル タ イ ム PCR に よ り beg し 検 た と こ ろ, C - RAMP2 - / - の heart perforatien で は ミ ト コ ン ド リ ア suppression factor pgc-1 alpha alpha の heritage 伝 発 now - move が, incomplete heart masato even factor の - move に first し て recognize め ら れ た. ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト で は, pgc-1 alpha の suppression に masato わ る こ と が report さ れ て い る after CREB の リ ン acidification low が recognize め ら れ た. C - RAMP2 - / - に お け る after CREB system of the royal institution を Ming ら か と す る た め に, AM - RAMP2 の obscene シ グ ナ ル を beg し 検 た と こ ろ, intracellular cAMP の reducing や, AM の obscene シ グ ナ ル molecular の リ ン acidification low が recognize め ら れ た. ま た, フ ォ ル ス コ リ ン cast with に よ り intracellular cAMP を raised plus さ せ た と こ ろ, C - RAMP2 - / - の heart insufficiency に improve が recognize め ら れ た. With others in に C - RAMP2 - / - の trainees enrolled in muscle cells in the early に フ ォ ル ス コ リ ン を add し た と こ ろ, ミ ト コ ン ド リ ア membrane potential な ど に improve を recognize め た. の above results か ら, AM - RAMP2 は heart muscle ミ ト コ ン ド リ ア の を dielectric function, maintaining system, initiates a し て heart viscera の constancy to maintain important で に あ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

Adrenomedullin-RAMP2 System Is Crucially Involved in Retinal Angiogenesis

• DOI: 10.1016/j.ajpath.2013.02.015
• 发表时间: 2013-06-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY
• 影响因子: 6
• 作者: Iesato, Yasuhiro;Toriyama, Yuichi;Shindo, Takayuki
• 通讯作者: Shindo, Takayuki

Adrenomedullin-RAMP2 system is essential for cardiac homeostasis

肾上腺髓质素-RAMP2 系统对于心脏稳态至关重要

• 发表时间: 2011
• 作者: T. Yoshizawa;T. Sakurai;A. Kamiyoshi;Y. Shindo;H. Kawate;T. Koyama;R. Uetake;L. Yang;A. Yamauchi;M. Tanaka;K. Igarashi;H. Kawakami;H. Nakanishi;R. Taguchi;T. Nakanishi;T. Shindo
• 通讯作者: T. Shindo

アドレノメデュリンによる心臓ミトコンドリア保護作用

肾上腺髓质素对心脏线粒体的保护作用

• 发表时间: 2012
• 作者: Koyama T;Yoshizawa T;et al;吉沢隆浩;吉沢隆浩
• 通讯作者: 吉沢隆浩

心臓における薬物誘発性ミトコンドリア障害に対するアドレノメデュリンの病態生理学的意義

肾上腺髓质素对药物引起的心脏线粒体功能障碍的病理生理意义

• 发表时间: 2012
• 作者: 吉沢隆浩;桜井敬之;神吉昭子;新藤優佳;小山晃英;植竹龍一;新藤隆行
• 通讯作者: 新藤隆行

Induction of LYVE-1/stabilin-2-positive liver sinusoidal endothelial-like cells from embryoid bodies by modulation of adrenomedullin-RAMP2 signaling

• DOI: 10.1016/j.peptides.2011.07.005
• 发表时间: 2011-09-01
• 期刊: PEPTIDES
• 影响因子: 3
• 作者: Arai, Takuma;Sakurai, Takayuki;Shindo, Takayuki
• 通讯作者: Shindo, Takayuki