Development of a novel active targeting system based on split SNAP-tag

基于分裂SNAP标签的新型主动瞄准系统的开发

• 批准号: 22680041
• 负责人: MIE Masayasu
• 金额: $ 13.64万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010-04-01 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22680041/
• 关键词: SNAP-tag; complementation; タンパク質間相互作用; ターゲティング; ルシフェラーゼ

In this experiment, a novel active targeting system based on split SNAP-tag was developed. Firstly, split SNAP-tag complementation was studied. Split SNAP-tags, fragments of divided SNAP-tag were fused to proteins that can interact with each other. After incubation with a fluorescent SNAP-tag substrate, cells that expressed split SNAP-tag fusion proteins generated fluorescent signals when these proteins interacted. It was shown that split SNAP-tag labeling method should be a useful tool for visualization of protein-protein interaction processes.Next, for using DNA aptamer in our system, we developed a method for site-specific labeling of single-stranded DNA (ssDNA) to a recombinant protein of interest (POI) through the Gene-A* protein (Gene-A*) from bacteriophage phi X174, without any chemical modifications of ssDNA.

在本实验中，开发了一种新型的基于分离式SNAP-Tag的主动目标系统。首先，研究了拆分式SNAP-Tag互补。拆分SNAP标签，将拆分的SNAP标签片段融合到能够相互作用的蛋白质中。在与荧光SNAP-Tag底物孵育后，表达分裂的SNAP-Tag融合蛋白的细胞在这些蛋白相互作用时产生荧光信号。接下来，为了在我们的系统中使用DNA适配子，我们发展了一种通过噬菌体Phi x174的基因-A*蛋白(gene-A*)将单链DNA(SsDNA)定位到重组蛋白(POI)的方法，而不需要对ssDNA进行任何化学修饰。

项目成果

Development of a specific siRNA delivery system into HeLa cells using an IgG-binding fusion protein

使用 IgG 结合融合蛋白开发 HeLa 细胞中的特异性 siRNA 递送系统

• DOI: 10.1007/s10529-013-1299-y
• 发表时间: 2013
• 期刊: Biotechnol Lett.
• 作者: Bae J;Mie M;Kobatake E
• 通讯作者: Kobatake E

Split SNAP-tag を利用したタンパク質間相互作用の蛍光イメージング法の開発

使用 Split SNAP-tag 开发蛋白质-蛋白质相互作用的荧光成像方法

• 发表时间: 2013
• 作者: H. Naito;Y. Akazawa;A. Miura;T. Matsumoto;M. Tanaka;喜多村和郎.;須藤 亮;Nobuyuki Morimoto;直木達彦・三重正和・小畠英理
• 通讯作者: 直木達彦・三重正和・小畠英理

Split SNAP-tagを利用したタンパク質間相互作用の蛍光イメージング法の開発

使用 Split SNAP-tag 开发蛋白质-蛋白质相互作用的荧光成像方法

• 发表时间: 2013
• 作者: 直木達彦;三重正和;小畠英理
• 通讯作者: 小畠英理

Construction of Semisynthetic DNA-Protein Conjugates with Phi X174 Gene-A* Protein

• DOI: 10.1021/bc300118m
• 发表时间: 2012-06-01
• 期刊: BIOCONJUGATE CHEMISTRY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Mashimo, Yasumasa;Maeda, Hitomi;Kobatake, Eiry
• 通讯作者: Kobatake, Eiry

Targeting of EGF-displayed protein nanoparticles with anticancer drugs

• DOI: 10.1002/jbm.b.33162
• 发表时间: 2014-11-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOMEDICAL MATERIALS RESEARCH PART B-APPLIED BIOMATERIALS
• 影响因子: 3.4
• 作者: Matsumoto, Rie;Nara, Rieko;Kobatake, Eiry
• 通讯作者: Kobatake, Eiry