人工胚中心反応系を用いた免疫記憶活性化分子の探索及び抗腫瘍B細胞療法の検証と応用

利用人工生发中心反应系统寻找免疫记忆激活分子及抗肿瘤B细胞疗法的验证与应用

• 批准号: 22700899
• 负责人: 野嶋 卓也
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Tokyo University of Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22700899/
• 关键词: 腫瘍免疫; 長期生存形質細胞; 記憶B細胞; 胚中心反応; メラノーマ; 抗体医薬; 液性免疫

本研究では独自に開発した『in vitro記憶B細胞/長期生存型形質(LLP)細胞誘導系』を用い、記憶B細胞の性状解析、新規抗腫瘍療法の検討、及び新規抗体医薬品製造方法の検討を行った。1)本手法は、CD40LとBAFFを発現する3T3細胞(40LB細胞)とIL-4で数日培養したマウスB細胞をy線照射したマウスに移入することで、多量の誘導記憶B(iMB)細胞を構築することが出来る。誘導したHEL抗原特異的BCRを発現するiMB細胞は脾臓辺縁体に限局的に集積していたが、記憶T細胞存在下でHEL抗原を免疫するとほぼ全てのiMB細胞は赤脾髄に移動し抗体産生細胞へ分化した。すなわち記憶B細胞の即時応答性を保証する仕組みの一つとして、抗原補足が容易な脾臓辺縁洞近傍に局在することが重要であると考えられる。2)40LBとIL-4で数日培養したB細胞を、40LBとIL-21でさらに数日培養後マウスに移入するとLLP細胞となり生着する。そこでHEL抗原を細胞表面に発現するB16メラノーマ細胞(B16-mHEL)を作成し、誘導LLP細胞が恒常的に産生する抗HEL抗体による腫瘍抑制効果を調べた、その結果LLP細胞を移入した個体はB16-mHELメラノーマの肺転移が顕著に抑制された。よって適応症例によっては効果的な腫瘍抑制法となることが示唆された。3)極めて効率的にB細胞を増加させることが出来る本手法と、BCRシグナルがFasデスシグナルを抑制する機構を組み合わせ、末梢血B細胞集団から任意の抗原特異的B細胞を選別する手法の構築を試みた。そのためにFasLとmHELを発現させた40LB細胞(FL)を作成した。HEL抗原特異的なB細胞を1%含む培養B細胞をFL上で数時間培養すると、HEL特異的B細胞は最大80%にまで濃縮された。よって目的抗原を発現させたFL細胞を用いれば簡便に任意の抗原特異的B細胞を得られる事が示された(PCT出願)。

This study で は に alone open 発 し た "in vitro memory B cells/long-term survival character (LLP) cells induced" を の traits い, memory B cells with parsing, new rules anti swollen sores therapy の 検 please, new rules and び antibody medical 薬 product manufacturing methods の 検 line for を っ た. 1) this gimmick は, CD40L と BAFF を 発 now す る 3 t3 cells (40 lb) と で IL - 4 days training し た マ ウ ス を y B cell line irradiation し た マ ウ ス に move す る こ と で, more quantity の induced memory B cells (iMB) を build す る こ と が る. Induced し た HEL antigen specific BCR を 発 now す る iMB は splenic cells 辺 try body に limit bureau に set product し て い た が, memory T cells in the presence of で を HEL antigen immune す る と ほ ぼ full て の iMB spleen marrow cells は chek に mobile し antibody generation cells へ し た. す な わ ち memory B cells の instant 応 answer を ensure す る blackstone group み の a つ と し て, easy antigen complement が な splenic 辺 try hole near alongside に bureau in す る こ と が important で あ る と exam え ら れ る. 2) 40 lb と で IL - 4 days training し た を B cells, 40 lb と IL - 21 で さ ら に days after incubation マ ウ ス に move す る と LLP cells と な り with す る. そ こ で HEL を cell surface antigen に 発 now す る B16 メ ラ ノ ー マ cells (B16 - mHEL) を make し, induction LLP が constant に produce す る HEL antibody resistance に よ る swollen sores inhibition of unseen fruit を adjustable べ た, そ の results を LLP cells move し た individual は B16 - mHEL メ ラ ノ ー マ の lung planning move が 顕 に inhibit さ Youdaoplaceholder0. The な abscess inhibition method for よって suitable for 応 cases によって によって results となる とが とが とが shows された. 3) extremely め て に B cells を sharper rates raised plus さ せ る こ と が る this gimmick と, BCR シ グ ナ ル が Fas デ ス シ グ ナ ル を inhibit す る agency を team み close わ せ B cells and peripheral blood collection 団 か ら arbitrary の antigen specific B cell を choose don't す る gimmick の build を try み た. Youdaoplaceholder0 ためにFasLとmHELを occurrence させた40LB cells (FL)を to form a た. HEL antigen-specific なB cells を1% containing む cultured B cells をFL で number of time cultured すると HEL specific B cells すると up to 80%にまで concentrated された. よ っ て purpose antigen を 発 now さ せ た FL cells を using い れ ば simple に arbitrary の antigen specific B cell を have ら れ が る things in さ れ た (PCT).

项目成果

Tolerance Induction of IgG+ Memory B Cells by T Cell-Independent Type II Antigens

• DOI: 10.4049/jimmunol.1100213
• 发表时间: 2011-05-15
• 期刊: JOURNAL OF IMMUNOLOGY
• 影响因子: 4.4
• 作者: Haniuda, Kei;Nojima, Takuya;Kitamura, Daisuke
• 通讯作者: Kitamura, Daisuke

T-cell dependent IgG1 B-cell memory is not activated, but tolerized, on binding eith T-cell independent type II antigen.

T 细胞依赖性 IgG1 B 细胞记忆在结合 T 细胞非依赖性 II 型抗原时不会被激活，而是被耐受。

• 发表时间: 2010
• 作者: Kei Haniuda;Takuya Nojima;Daisuke Kitamura
• 通讯作者: Daisuke Kitamura

The germinal center-like culture system revealed that IL-21 reversibly inhibits memory-B-cell generation in vitro

生发中心样培养系统揭示 IL-21 可逆地抑制体外记忆 B 细胞的生成

• 发表时间: 2010
• 作者: 井上正広;高橋信;Takuya Nojima
• 通讯作者: Takuya Nojima

抗原特異的B細胞集団の製造方法

产生抗原特异性B细胞群的方法

• 发表时间: 2009

Role of IL-21 in memory-versus-plasma cell fate decision of germinal center B cells induced in vitro

IL-21在体外诱导的生发中心B细胞记忆与浆细胞命运决定中的作用

• 发表时间: 2010
• 作者: Kitano;M. and Okada;T;Takuya Nojima
• 通讯作者: Takuya Nojima