Molecular mechanisms for expression of renal potassium channels in doubly-perfused cultured collecting duct cells.

双灌注培养的集合管细胞中肾钾通道表达的分子机制。

• 批准号: 23590264
• 负责人: KUBOKAWA Manabu
• 金额: $ 2.25万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23590264/
• 关键词: ROMK; Kチャネル; 膜蛋白質遺伝子発現; 遺伝子発現; M-1細胞; 管腔膜; 腎集合管; 遺伝子導入; チャネル発現; 腎集合管細胞; 細胞膜極性; パッチクランプ法; 膜発現; チャネル活性; チャネル局在; 腎尿細管; 集合管; イオンチャネル; MI細胞; インサート; 二重還流装置

Renal K secretion is mediated by the collecting duct cell, and apical ROMK K channels are responsible for this secretion. Although regulation of the ROMK K channel activity has been examined by many reserachers, precise mechanisms for channel expression to the apical membrane is still unknown. In this study, we investigated the expresssion mechanisms using exogeneously transfected cloned ROMK K channels to cultured M-1 kidney cells. Channel expression was observed with fluorescent microscope and channel current was examined using the patch-clamp technique. As the results, expression of ROMK to the apical membrane requred no PDZ domain in the membrane, but other membanes required PDZ domain to express ROMK K channels. Since ROMK K channels are expressed only to the apical membrane but not the basolateral membrane in vivo, it is suggested that ROMK K channels are selectively expressed to the apical membrane in the epithelial cells which may possesses no ROMK-PDZ domain in the membrane.

肾 K 分泌由集合管细胞介导，顶端 ROMK K 通道负责这种分泌。尽管许多研究人员已经研究了 ROMK K 通道活性的调节，但通道表达到顶膜的精确机制仍然未知。在本研究中，我们使用外源转染克隆 ROMK K 通道到培养的 M-1 肾细胞中研究了表达机制。用荧光显微镜观察通道表达，并使用膜片钳技术检查通道电流。结果，顶膜表达 ROMK 不需要膜中的 PDZ 结构域，但其他膜需要 PDZ 结构域来表达 ROMK K 通道。由于 ROMK K 通道在体内仅表达至顶膜而不表达至基底外侧膜，因此表明 ROMK K 通道选择性表达至上皮细胞的顶膜，而膜中可能不具有 ROMK-PDZ 结构域。

项目成果

培養M1集合管細胞へのROMK遺伝子導入によるチャネル活性発現と細胞膜極性との関連

培养M1集合管细胞导入ROMK基因通道活性表达与细胞膜极性的关系

• 发表时间: 2013
• 作者: 久保川学;中村一芳;真柳平;祖父江憲司
• 通讯作者: 祖父江憲司

PATCH CLAMP TECHNIQUE

膜片钳技术

• 发表时间: 2012
• 作者: Akira Ikari;Ayumi Takiguchi;Kosuke Atomi;Yasuhiro Yamazaki;Junko Sugatani;Manabu Kubokawa
• 通讯作者: Manabu Kubokawa

培養ヒト近位尿細管細胞のK+チャネル活性に対するtumor necrosis factor-aの促進作用

肿瘤坏死因子-A对培养人近端肾小管细胞K+通道活性的促进作用

• 作者: 中村一芳;駒切 洋;久保川 学
• 通讯作者: 久保川 学

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Recent Research Developments in Physiology

生理学的最新研究进展

• 发表时间: 2005
• 作者: Matuyayama;H. et al.;Izumi N. et al.;El-Mahmoudy A. et al.;El^Mahmoudy A et al.
• 通讯作者: El^Mahmoudy A et al.