Functional analysis of the FANCD2 interactors containing ubiquitin binding domain

含有泛素结合域的 FANCD2 相互作用子的功能分析

• 批准号: 23590380
• 负责人: ISHIAI Masamichi
• 金额: $ 3.41万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23590380/
• 关键词: ユビキチン; DNA修復; DNA損傷応答; ファンコニ貧血; 癌; 環境; FANCD2; DT40細胞; UBR5; UFD1; タンパク質

The Fanconi anemia (FA) pathway is critically involved in DNA damage responses and DNA repair. A key protein, FANCD2, is monoubiquitinated and accumulates in chromatin in response to DNA interstrand crosslinks (ICLs), where it coordinates DNA repair through mechanisms that are still poorly understand.We have isolated UBR5 and UFD1 as candidate interacting proteins for FANCD2. Both proteins contain ubiquitin-binding domains. We have established ubr5-deficient chicken DT40 cells, and SiRNA-based ufd1-knock down human cells. Unexpectedly, ubr5-deficient or ufd1-knock down cells showed little sensitivity to ICL reagents compared to wild type cells. Laser microirradiation experiments using GFP-UBR5 or GFP-UFD1 expressing human cells showed little GFP-protein accumulation after DNA damage. These results suggested that functional relationship between FA pathway and UBR5, or UFD1 including related proteins was not strong, at least in ICL repair.

范科尼贫血（FA）途径与DNA损伤反应和DNA修复密切相关。一个关键的蛋白质，FANCD 2，是monoubiquitinated和积累在染色质中响应DNA链间交联（ICLs），在那里它协调DNA修复通过机制，仍然知之甚少。这两种蛋白质都含有泛素结合域。我们已经建立了ubr 5缺陷的鸡DT 40细胞和基于siRNA的ufd 1敲低的人细胞。出乎意料的是，与野生型细胞相比，ubr 5缺陷型或ufd 1敲低细胞对ICL试剂显示出很小的敏感性。使用表达GFP-UBR 5或GFP-UFD 1的人细胞的激光微照射实验显示，DNA损伤后GFP蛋白的积累很少。这些结果表明，FA通路与UBR 5或UFD 1包括相关蛋白之间的功能关系并不强，至少在ICL修复中是如此。

项目成果

Establishiment of the DNA repair-defective mutants in DT40 cells in"DNA repair Protocols, Methods in Molecular Biology, vol. 920 (Bjerbak ed.)"(Chapter 4)

DT40 细胞中 DNA 修复缺陷突变体的建立，参见“DNA 修复方案，分子生物学方法，第 920 卷（Bjerbak 编辑）”（第 4 章）

• 发表时间: 2012
• 作者: Ishiai;M.;Uchida;E.;Takata;M.
• 通讯作者: M.

ファンコニ貧血原因遺伝子産物FANCD2の示すヒストンシャペロン活性の生理的意義

范可尼贫血基因产物 FANCD2 显示组蛋白伴侣活性的生理意义

• 发表时间: 2013
• 作者: 石合正道;佐藤浩一;胡桃坂仁志;高田穣
• 通讯作者: 高田穣

Histone chaperon activity of Fanconi anemia proteins, FANCD2 and FANCI, is required for DNA crosslink repair.

范可尼贫血蛋白 FANCD2 和 FANCI 的组蛋白伴侣活性是 DNA 交联修复所必需的。

• 发表时间: 2012
• 作者: Ishiai M;Sato K;Toda K;Furukoshi S;Osakabe A;Tachiwana H;Takizawa Y;kagawa W;Kitao H;Dohmae N;Obuse C;Kimura H;Takata M and Kurumizaka H
• 通讯作者: Takata M and Kurumizaka H

Molecular mechanisms of the Fanconi anemia pathway

范可尼贫血途径的分子机制

• 发表时间: 2011
• 作者: Masamicni Ishiai;Junya Tomida;Tomoko Shigechi;Akiko Itaya;Emi Uchida;Junya Unno;Minoru Takata
• 通讯作者: Minoru Takata

Roles of the Fanconi anemia protein FANCD2 in DNA crosslink repair.

范可尼贫血蛋白 FANCD2 在 DNA 交联修复中的作用。

• 发表时间: 2014
• 作者: Ishiai M;Unno J;Sato K;Itaya A;Tomida J;Kurumizaka H;Takata M.
• 通讯作者: Takata M.