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棘皮動物のプルテウス幼生形態の収斂進化をもたらした分子機構の解明

阐明导致棘皮动物幼虫形态趋同进化的分子机制

基本信息

批准号：
11J00274
负责人：
古賀皓之
金额：
$ 1.22万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2013
项目状态：
已结题

项目摘要

ウニやヒトデなどの棘皮動物は、プルテウス型幼生とオーリクラリア型幼生の2つの形態に分かれており、両者の大きな違いは、プルテウスが発達した幼生骨片の持つ事である。本研究では、プルテウス型の幼生形態の進化の重要なステップである幼生骨片の獲得機構を明らかにする事を目的としている。これまでの研究で、ヒトデ幼生では発現していないが、ウニの幼生では骨片形成に必要不可欠な遺伝子として、転写因子Alx1とVEGFシグナルのリガンド、受容体をコードする遺伝子を発見した。したがって、これらの因子が幼生期に発現することが、幼生骨片の獲得に関与することが示唆されたた。本年度は、それらの因子をそれぞれまたは同時に、イトマキヒトデ幼生に強制的に発現させた際に、どのような遣伝子発現の変化があるのかを検討すべく、次世代シーケンサーによるRNAseqのデータ解析を行なった。既にAlx1単独では、少数ながら遺伝子発現の変化があることがわかっていたが、VEGFリガンドと受容体の強制発現でも多くの遺伝子の発現レベルが変化することが示唆された。一方で、Alx1とVEGFシグナルの活性化の試みでは、遺伝子発現の変化は認められるものの、ミネラルの形成といった表現型レベルの変化は認められなかった。これは幼生骨片の獲得はこれら2因子の幼生発現だけでは不十分である可能性を示唆する。そこで、上記2因子と同様にヒトデ幼生では発現していない骨片形成因子をスクリーニングし、新たな幼生骨片獲得因子の候補を絞るべく、ヒトデ幼生と成体、および幼生骨片をもつクモヒトデ幼生と成体のトランスクリプトームの解析に着手した。イトマキヒトデとスナクモヒトデの幼生を飼育し、各3ステージの幼生からRNAを抽出し、次世代シーケンサー(Illumina Hiseq2000)によるRNAseqを行なった。今後のデータ解析により、新たな候補遺伝子の絞り込みが期待できる。

ウニやヒトデなどの echinoderms は, プルテウス type larval とオーリクラリア type larval の 2 つの form に points かれており, struck の big きな violations いは, プルテウスが発 da した larval bone の hold つ matter である. This study では, プルテウス type のの larval form evolution の important なステップである larval bone の from institutions を Ming らかにする matter を purpose としている. これまでの research で, ヒトデ larval では発 now していないが, ウニの larval では bone formation に need not owe な posthumous son 伝として, planning to write factor Alx1 と VEGF シグナルのリガンド, let body をコードする heritage 伝 son を発 see した. したがって, これらの factor が larval stage に発 now することが, young born bone の get に masato and することが in stopping されたた. は this year, それらの factor をそれぞれまたはに, at the same time イトマキヒトデ larval に mandatory に発 now させた interstate に, どのような son sent 伝発の now - the があるのかを beg す検べく, next generation シーケンサーによる RNAseq のデータ parsing line をなった. Both に Alx1 単 alone では, minority ながら posthumous son 伝発の now - the があることがわかっていたが, VEGF リガンドと by body の forced 発で modern も more くの posthumous son 伝の発 now レベルが variations change することが in stopping された. Party で, Alx1 と VEGF シグナルの activeness の try みでは, but 伝発の now - the は recognize められるものの, ミネラルの form といった phenotype レベルの variations change は recognize められなかった. The <s:1> れれら juvenile bone fragment <e:1> acquires the <s:1> れられら2 factor <e:1>, and the <s:1> juvenile occurrence だけで is not very likely を indicates する. そこで, 2 factor と written with others にヒトデ larval では発 now していない bone formation factor をスクリーニングし, new たな larval bone gain factor の alternate を ground るべく, ヒトデ larval と adult, および larval bone をもつクモヒトデ larval と adult のトランスクリプトームの parsing に to した. イトマキヒトデとスナクモヒトデの larval を rearing し, each 3 ステージの larval から RNA を spare し, next generation シーケンサー (Illumina Hiseq2000) による RNAseq を line なった. In the future, デデタタ will be analyzed at によ, and the new たな alternate 伝 sub-<s:1> will be released at 込みが込みが.