生体環境に応答するナノシステムによるがん標的型miRNA送達とがん治療への応用

使用响应生物环境的纳米系统进行癌症靶向 miRNA 递送及其在癌症治疗中的应用

• 批准号: 11J05557
• 负责人: 佐藤 悠介
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J05557/
• 关键词: miRNA; siRNA; pH応答性脂質; がん組織内浸透性; がん組織内分布; 粒子径; マイクロ流路; リポソーム; 新規pH応答性脂質

本研究の目的は、RNA干渉を誘起する機能性核酸miRNAを末梢の固形がん組織に送達可能なリポソーム型キャリアを構築することである。miRNAは短鎖二本鎖RNAであり、その構造や物性は、RNA干渉を誘起する人工核酸のsiRNAと同等であると考えられる。そこで、比較的安価なsiRNAをmiRNAの代用とした。これまでに、優れた核酸導入活性を有する新規pH応答性脂質YSK05を開発し、肝臓において高い遺伝子ノックダウン活性を有するキャリア(YSK05キャリア)の構築に成功した。YSK05キャリアをがん組織に応用したところ、遺伝子ノックダウンは認められたものの、キャリアのがん組織内浸透性が乏しく、その効率は60%程度で飽和した。がん組織内浸透性の乏しさは物理的バリアに起因すると考え、キャリアの小型化を試み、50nmから25nm程度への小型化に成功した。がん組織における遺伝子ノックダウン効率を上昇させるためには、キャリアの核酸導入活性の向上と、がん組織内分布の改善が重要であると考えられるため、今年度はそれらに着目して研究を行った。まず、YSK05よりも優れた核酸導入活性を有する脂質の開発を試みた結果、新規pH応答性脂質YSK13の合成に成功した。YSK13を含むキャリア(YSK13キャリア)はYSK05キャリアと比較して肝臓における活性が約4倍高いことが明らかとなった。これまでの検討により、肝臓における活性とがん組織における活性は正に相関することが明らかとなっており、YSK13キャリアはがん組織において優れた活性を示すと考えられる。また、25nmの小型キャリアのがん組織内分布を評価したところ、均一的な分布を示した。また、標的がん細胞への取り込み量の増加も認められた。

Purpose this study の は, RNA dry involved を induced す る functional nucleic acid of micrornas を endings の solid shape が ん organization に served can な リ ポ ソ ー ム type キ ャ リ ア を build す る こ と で あ る. Micrornas は short 2 lock lock RNA で あ り, そ は や の structure property, RNA dry involved を induced す る artificial nucleic acid の siRNA と equal で あ る と exam え ら れ る. Youdaoplaceholder0 た で, comparative 価なsiRNAをmiRNA <s:1> substitution と た た. こ れ ま で に, superior れ た nucleic acid import activity を す る new rules pH 応 a sexual lipid YSK05 を open 発 し routine, liver に お い て high い posthumous son 伝 ノ ッ ク ダ ウ ン activity を す る キ ャ リ ア (YSK05 キ ャ リ ア) built の に success し た. YSK05 キ ャ リ ア を が ん organization に 応 with し た と こ ろ, but 伝 ノ ッ ク ダ ウ ン は recognize め ら れ た も の の, キ ャ リ ア の が ん tissues が soak spent し く, そ の unseen は 60% saturated degree で し た. が ん tissues の soak spent し さ は physical バ リ ア に cause す る と え test, キ ャ リ ア の miniaturization を み, 50 nm か ら 25 nm level へ の miniaturization に successful し た. が ん organization に お け る heritage 伝 son ノ ッ ク ダ ウ ン sharper rate rising を さ せ る た め に は, キ ャ リ ア の nucleic acid into active の と upward, が ん tissues distribution の improve が important で あ る と exam え ら れ る た め, our は そ れ ら に with mesh し を line っ て research た. ま ず, YSK05 よ り も optimal れ た nucleic acid import activity を す る lipid の open 発 を try み た results, new rules on pH 応 answer lipid YSK13 の synthetic に successful し た. YSK13 を containing む キ ャ リ ア (YSK13 キ ャ リ ア) は YSK05 キ ャ リ ア と compare し て routine liver に お け る active が about four times as high い こ と が Ming ら か と な っ た. Beg に こ れ ま で の 検 よ り routine, liver に お け る active と が ん organization に お け は る activity is に phase masato す る こ と が Ming ら か と な っ て お り, YSK13 キ ャ リ ア は が ん organization に お い て optimal れ を た activity in す と exam え ら れ る. ま た, 25 nm の small キ ャ リ ア の が ん を evaluation organization distribution 価 し た と こ ろ and uniform distribution of な を し た. Youdaoplaceholder0, the target がん cells へ <s:1> take the amount of 込み <s:1> and increase また to recognize められた.

项目成果

ENDSOMAL ESCAPE OF LIPOSOML SIRNA VIA MEMBRANE FUSION AND IN VIVO DHLIVERY TO TUMOR

脂质体 SIRNA 通过膜融合的胞内逃逸和体内递送至肿瘤

• 发表时间: 2011
• 作者: 佐藤悠介;畠山浩人;渡邊綱正;小原道法;原島秀吉;村田真那美;宮部寛子;末光永里奈;秋田英万;櫻井遊;石破諒平;佐藤悠介;櫻井遊;林泰弘;佐藤悠介;佐藤悠介;佐藤悠介;櫻井遊
• 通讯作者: 櫻井遊

脂質構造体にpH依存性カチオン性を付与する剤、それによりpH依存性カチオン性が付与された脂質膜構造および脂質膜構造体の製造方法

向脂质结构体赋予pH依赖性阳离子性的试剂、使用该试剂赋予pH依赖性阳离子性的脂质膜结构体以及脂质膜结构体的制造方法

• 发表时间: 2012

新規アジュバントc-di-GMPの効率的DDSの創製

新型佐剂c-di-GMP的高效DDS的创建

• 发表时间: 2013
• 作者: 佐藤悠介;畠山浩人;渡邊綱正;小原道法;原島秀吉;村田真那美;宮部寛子
• 通讯作者: 宮部寛子

Mogat1 siRNA搭載型in vivoデリバリーシステムを用いた2型糖尿病予防効果の検証

使用配备 Mogat1 siRNA 的体内递送系统验证 2 型糖尿病预防效果

• 发表时间: 2012
• 作者: 佐藤悠介;畠山浩人;渡邊綱正;小原道法;原島秀吉;村田真那美;宮部寛子;末光永里奈
• 通讯作者: 末光永里奈

Confirming RNAi-mediated gene silencing in tumor by PEGylated siRNA-loaded liposome

通过装载 PEG 化 siRNA 的脂质体确认肿瘤中 RNAi 介导的基因沉默

• 发表时间: 2012
• 作者: 佐藤悠介;畠山浩人;渡邊綱正;小原道法;原島秀吉;村田真那美;宮部寛子;末光永里奈;秋田英万;櫻井遊;石破諒平;佐藤悠介;櫻井遊
• 通讯作者: 櫻井遊