レーザーインジェクション技術を基盤とした配偶体間相互作用を支える助細胞機能の解明

基于激光注射技术阐明支持配子体间相互作用的协同细胞功能

• 批准号: 11J06264
• 负责人: 筒井 大貴
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J06264/
• 关键词: トレニア; 助細胞; 花粉管; 次世代シーケンサー; シロイヌナズナ; 細胞間コミュニケーション; インジェクション; モルフォリノオリゴ

被子植物の卵細胞の脇に2つある助細胞は、植物が受精を達成する上で必要不可欠な細胞である。受精のため、精細胞を含む花粉管が迷うことなく胚嚢にたどり着くには、助細胞から分泌される低分子量タンパク質LUREsが必須である(Okuda, Tsutsui et al., Nature, 2009)。さらに、2つある助細胞のうち一方が花粉管の破裂に先立って細胞死を起こし、精細胞放出のための場を提供する。誘引から受精に至るまでに、花粉管と助細胞の間に細胞間コミュニケーションの存在が示唆されているが、その分子的メカニズムには謎が多い。そこで、我々は、助細胞で発現する遺伝子のなかに、この細胞間コミュニケーションに重要な因子があると考え、胚嚢の顕微操作が容易であるトレニア(Torenia fournieri)を材料とし、次世代シーケンサーによる遺伝子発現解析を行なった。昨年度までに、次世代シーケンサーで解析するサンプルの前処理についての条件検討を終えていたので、今年度は実際に解析を行なった。また、中央細胞および卵細胞についても同様に遺伝子発現解析を行なった。その結果、各細胞で特異的に発現する遺伝子群が明らかとなり、細胞間コミュニケーションへの関与が示唆される遺伝子の絞り込みも進めた。また、トレニアで助細胞特異的な発現を示した遺伝子群について、シロイヌナズナにおけるホモログを探索し、それらについても機能解析を進めた。その結果、amiR(人工micro RNA)によるノックダウンで細胞間コミュニケーションに異常を示す遺伝子群を同定しており、今後の詳細な実験による機能解明が期待される。

The egg cells of angiosperms are essential for fertilization. Fertilization, sperm cell, pollen tube, embryo, helper cell, secretion, low molecular weight LUREs (Okuda, Tsutsui et al., Nature, 2009)。The first step in the process of pollen tube rupture and the second step in the process of sperm cell release The existence of intercellular hormones in the process of inducing fertilization, pollen tube and helper cells indicates that there are many molecular hormones in the process. The analysis of gene expression in the next generation of cell culture is easy to be done by micromanipulation of embryo and embryo. Last year, the next generation of service analysis, service pre-processing, final analysis, this year, the actual analysis The central cell and the egg cell are the same as each other. As a result, each cell-specific gene is expressed in different sub-groups, in different cell-to-cell relationships, and in different sub-groups. To explore and analyze the function of cell specific development, we need to find out the function of cell specific development. The results, amiR(artificial micro RNA), and the function of the abnormal expression subgroup in the intercellular communication system are expected to be clarified in detail in the future.

项目成果

ライブイメージングと細胞除去による雌性配偶体構成細胞の機能獲得における細胞間相互作用の解析

通过活体成像和细胞去除分析雌配子体细胞功能获取过程中的细胞间相互作用

• 发表时间: 2013
• 作者: 須崎 大地;武内 秀憲;筒井 大貴;椎名 恵子;新田 英之;東山哲也
• 通讯作者: 東山哲也

トレニア助細胞EST解析を基盤とした雌雄間相互作用を司る因子の探索と解析

基于蓝猪耳增效剂细胞EST分析的男女相互作用控制因素的搜索和分析

• 发表时间: 2011
• 作者: 筒井大貴;他4名
• 通讯作者: 他4名

Laser-assisted thermal-expansion microinjection and its applications

激光辅助热膨胀显微注射及其应用

• DOI: 10.5685/plmorphol.24.33
• 发表时间: 2012
• 期刊: PLANT MORPHOLOGY
• 作者: 筒井大貴;東山哲也
• 通讯作者: 東山哲也

Analysis of synergid cell specific genes based on laser microinjection technique

基于激光显微注射技术的协同细胞特异性基因分析

• 发表时间: 2012
• 作者: Tsutsui H;Okuda S;Shiina K;Sasaki N;Higashiyama T
• 通讯作者: Higashiyama T

雌性配偶体の遺伝子発現解析による生殖関連因子の探索と機能解析

通过雌配子体基因表达分析探索生殖相关因子及功能分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 筒井大貴;鈴木孝征;東山哲也
• 通讯作者: 東山哲也