スプライシング異常によるPOLDIP3の機能喪失に着目したALS病態機序の解明

阐明 ALS 病理机制，重点关注剪接异常导致 POLDIP3 功能丧失

• 批准号: 11J07914
• 负责人: 志賀 篤
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11J07914/
• 关键词: ALS; TDP-43; POLDIP3; 筋萎縮性側索硬化症; スプライシング; 筋委縮性側索硬化症

本研究の目的は, "TDP-43の核外移行による核内でのTDP-43の機能喪失が, POLDIP3遺伝子のスプライシング異常と機能低下を引き起こし, 結果としてmTORシグナルの異常を生じ, 運動神経細胞死を誘導する", という仮説を検証し, ALS病態機序を解明することである. これを達成するため本研究では, 分子病理学的手法を用いた検討を行った.ALS患者運動ニューロンで, 実際にPOLDIP3のスプライシング異常が起こっているかを検討した. ALS患者凍結脊髄組織より凍結切片を作製し, レーザーマイクロダイセクション(LCM)装置を用いて運動ニューロンをサンプリングした. 得られた細胞からtotal RNAを回収し, POLDIP3のスプライシングを評価した. 結果, ALS患者脊髄運動ニューロンにおいて, 培養細胞系で確認されたTDP-43機能低下時のスプライシング変化に一致した変化を認めた.本研究で申請者は, TDP-43の機能喪失がmTORシグナルに関与するPOLDIP3のスプライシング異常を引き起こすことを見出し, それがALS患者運動ニューロンにおいても認められることを明らかとした. しかしながら, このスプライシング異常が運動ニューロンに与える影響に関する実験は, その準備のみに留まった. 今後は, 今年度準備した手法を用い, この現象のALS病態との関連をより綿密に検討する.

は の purpose, this study "TDP - 43 の nucleus transitional に よ る intranuclear で の TDP - 43 の function loss of が POLDIP3 posthumous son 伝 の ス プ ラ イ シ ン グ low abnormal function of と を lead き up こ し, results と し て mTOR シ グ ナ ル の abnormal を じ, sports god 経 induced cell death を す る", Said と い う 仮 を 検 し, ALS pathological machine sequence を interpret す る こ と で あ る. こ れ を reached す る た め this study で は, the technique of molecular pathology を with い た 検 line for を っ た. ALS patients exercise ニ ュ ー ロ ン で, Be interstate に POLDIP3 の ス プ ラ イ シ ン グ abnormal が up こ っ て い る か を beg し 検 た. ALS patients with frozen ridge marrow tissue よ り し, the freezing slice を cropping レ ー ザ ー マ イ ク ロ ダ イ セ ク シ ョ ン (LCM) using the い を て movement ニ ュ ー ロ ン を サ ン プ リ ン グ し た. The を total RNAを of られた cells is reproduced られた, and POLDIP3 <s:1> スプラ シ シ グを グを グを comments 価 た た. Marrow movement as a result, patients with ALS ridge ニ ュ ー ロ ン に お い て, cultivate cell line で confirm さ れ た TDP - 43 function is low when の ス プ ラ イ シ ン グ variations change consistent に し た variations change を recognize め た. This study で applicants は, TDP - 43 の disabilities が mTOR シ グ ナ ル に masato and す る POLDIP3 の ス プ ラ イ シ ン グ abnormal を lead き up こ す こ と を see し, そ れ が ALS patients exercise ニ ュ ー ロ ン に お い て も recognize め ら れ る こ と を Ming ら か と し た. し か し な が ら, Abnormal こ の ス プ ラ イ シ ン グ が movement ニ ュ ー ロ ン に and え る influence に masato す る be 験 は, そ の prepare の み に leave ま っ た. In the future, た, this year, we will prepare to た, を, を, <s:1>, <s:1>, <s:1>, ALS, pathological と, をよ, related をよ, and closely に検 to する.

项目成果

Aberrant splicing of POLDIP3 gene in motor neuron with ALS

患有 ALS 的运动神经元 POLDIP3 基因的异常剪接

• 发表时间: 2011
• 作者: Shiga A;et al ;;志賀篤
• 通讯作者: 志賀篤