大腸癌幹細胞に対する免疫療法の開発

结直肠癌干细胞免疫治疗的进展

• 批准号: 12J02959
• 负责人: 守田 玲菜
• 金额: $ 2.32万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J02959/
• 关键词: 癌幹細胞; 大腸癌; 癌免疫療法; 癌ペプチドワクチン

本年度は過去2年間に施行した実験結果に基づき、以下の実験を実施した。(1) OR7C1のシグナル伝達の解析：1年次実施した結果から、OR7C1の直下のシグナルが、アデニル酸シクラーゼ(AC)の活性化もしくはホスホリパーゼC(PLC)の活性化である可能性が高いと考えられた。さらに、PLC阻害剤であるU-73122で処理した場合SOX2の発現は低下したことから、PLCを経由するシグナル伝達経路が関わっている可能性が想定された。その下流の動きを探るため、OR7C1過剰発現株を用いてリン酸化aktの発現を確認した。施行したすべての細胞株でp-aktの発現が上昇していた。(2)OR7C1の上皮間葉転換への影響：OR7C1が癌幹細胞の維持に重要な役割を果たすことは1年次2年次の実験で明らかになった。OR7C1が癌の転移にも影響するのか検討した。癌の転移の第一段階として、上皮間葉転換（EMT）は重要である。EMTの形質を判断する材料として、大腸癌細胞株SW480のOR7C1過剰発現株とコントロール細胞で間葉系マーカーであるSnail family zinc finger 1 (SNAL1), Cadherin (CDH1, 2), Vimentin (VIM), matrix metalloproteinase-2 (MMP-2)　をRT-PCRで確認した。その結果、OR7C1過剰発現株では、VimentinおよびMMP-2の発現が上昇していることが確認された。この結果は、SW480-OR7C1過剰発現株を免疫不全マウスに異所性接種して得られた腫瘍の免疫染色の結果からも裏付けられた。また、in vitroでの浸潤能を専用チャンバー（BD BioCoat Matrigel Invasion Chamber）を用いて検討したところ、有意差をもってOR7C1過剰発現株で浸潤能が高まっていた。

This year, the implementation of the basic results of the past 2 years, the implementation of the following (1)Analysis of OR7 C1: 1-year implementation results, OR7 C1: 1:1-year implementation results, OR7 C1: 1:1-year implementation results, OR7 C1: 1:1-year implementation results, OR7 C1: 1:1:1-year implementation results, OR7 C1: 1:1-year implementation results, OR7 C1: The possibility of SOX2 occurrence in the event of PLC block U-73122 processing is considered. The occurrence of the acid akt was confirmed by the detection of the downstream activity of the OR7 C1. The expression of p-akt in the cells was increased. (2) The effect of epithelial mesenchymal transition of OR7C1: OR7C1 plays an important role in the maintenance of cancer stem cells. OR7 C1 is the first time that cancer has been detected. The first stage of cancer metastasis, epithelial mesenchymal transition (EMT) is important. EMT was identified by RT-PCR from OR7C1, SW480, and Snail family zinc finger 1 (SNAL1), Cadherin (CDH1, 2), Vimentin (VIM), and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2). The results showed that OR7 C1 had been detected and Vimentin MMP-2 had been detected. SW480-OR7C1 was found to be immunodeficient. BD BioCoat Matrigel Invasion Chamber (BD BioCoat Matrigel Invasion Chamber) is used to investigate the effects of different factors on the growth of OR7 C1 plants.

项目成果

Ovarian cancer stem cells are enriched in side population and aldehyde dehydrogenase bright overlapping population.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0068187
• 发表时间: 2013
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Yasuda K;Torigoe T;Morita R;Kuroda T;Takahashi A;Matsuzaki J;Kochin V;Asanuma H;Hasegawa T;Saito T;Hirohashi Y;Sato N
• 通讯作者: Sato N

Fungemia due to Trichosporon dermatis in a patient with refractory Burkitt's leukemia.

难治性伯基特白血病患者因皮毛孢子菌引起的真菌血症。

• 发表时间: 2013
• 期刊: Blood Research.
• 作者: Hashino S;Takahashi S;Morita R;Kanamori H;Onozawa M;Kawamura T;Kahata K;Kondo T;Tokimatsu I;Sugita T;Akizawa K;Asaka M.
• 通讯作者: Asaka M.

Establishment of human cancer stem-like celltargeting immunotherapy.

人类癌症干细胞样细胞靶向免疫疗法的建立。

• 发表时间: 2013
• 作者: Morita R;Hirohashi Y;Torigoe T;Takahashi A;Tamura Y;Hashino S;Asaka M. Sato N.
• 通讯作者: Asaka M. Sato N.

大腸がん幹細胞新規癌抗原を標的としたペプチドワクチン療法の基礎的検討

针对结直肠癌干细胞新癌抗原的肽疫苗治疗基础研究

• 发表时间: 2012
• 作者: Morita R;Hirohashi Y;Torigoe T;Takahashi A;Tamura Y;Hashino S;Asaka M. Sato N.;守田玲菜;守田玲菜;守田玲菜
• 通讯作者: 守田玲菜

Establishment of human cancer stem cell targeting immunotherapy

人类肿瘤干细胞靶向免疫疗法的建立

• 发表时间: 2012
• 作者: Morita R;Hirohashi Y;Torigoe T;Takahashi A;Tamura Y;Hashino S;Asaka M. Sato N.;守田玲菜
• 通讯作者: 守田玲菜