ヒト造血器悪性腫瘍幹細胞の自己複製における対称性分裂・非対称分裂の役割の解明

昨年度、ヒト白血病検体、特に急性白血病において白血病幹細胞分画の非対称性分裂が正常幹細胞と比較して亢進していることを明らかにした。今年度はマウス白血病モデルを用いてこの現象が確認できるかを実施した。マウス骨髄より顆粒球マクロファージ前駆細胞(GMP)を分取し、レトロウイルスによってMLL-AF 9融合遺伝子を導入し、マウスに移植することで白血病マウスを作成した。白血病マウスより、白血病幹細胞分画(L-GMP, Lineage- cKit+ Scal- CD34+)および正常マウスのGMP分画を採取し, 分裂像を観察した。c-KitおよびGr-1の発現により、対称性自己複製、非対称性自己複製、および分化に分類したところ、正常GMP分画では対称性自己複製が10.1%, L-GMPでは12.8%と相違を認めなかったが、非対称性自己複製は正常GMPで34.8%に対し、L-GMPでは55.3%と増加を認めた。一方分化については正常GMPが55%に対しL-GMPは31.9%と減少しており、白血病幹細胞を特徴づけるのは非対称性分裂の増加および分化の減少であることをマウスモデルにおいても確認した。

昨年度、ヒト白血病検体、特に急性白血病において白血病幹細胞分画の非対称性分裂が正常幹細胞と比較して亢進していることを明らかにした。今年度はマウス白血病モデルを用いてこの現象が確認できるかを実施した。マウス骨髄より顆粒球マクロファージ前駆細胞(GMP)を分取し、レトロウイルスによってMLL-AF 9融合遺伝子を導入し、マウスに移植することで白血病マウスを作成した。白血病マウスより、白血病幹細胞分画(L-GMP, Lineage- cKit+ Scal- CD34+)および正常マウスのGMP分画を採取し, 分裂像を観察した。c-KitおよびGr-1の発現により、対称性自己複製、非対称性自己複製、および分化に分類したところ、正常GMP分画では対称性自己複製が10.1%, L-GMPでは12.8%と相違を認めなかったが、非対称性自己複製は正常GMPで34.8%に対し、L-GMPでは55.3%と増加を認めた。一方分化については正常GMPが55%に対しL-GMPは31.9%と減少しており、白血病幹細胞を特徴づけるのは非対称性分裂の増加および分化の減少であることをマウスモデルにおいても確認した。