環境刺激によるシロイヌナズナの小胞体ストレス応答経路の活性化機構

サリチル酸とシロイヌナズナの小胞体ストレス応答の関係および植物の小胞体ストレス応答における情報伝達経路の一つIRE1-bZIP60経路の細胞質スプライシングの連結反応に関与する未知のRNAリガーゼについて以下の研究をおこなった。サリチル酸と小胞体ストレス応答の関係の解明サリチル酸処理による小胞体シャペロンの転写レベルの誘導や小胞体ストレス応答関連転写因子bZIP60の活性化をこれまでに明らかにしていた。bZIP60と同様に小胞体ストレス応答関連転写因子bZIP28のサリチル酸による活性化について調べた。bZIP28特異的な抗体によるイムノブロット解析の結果、サリチル酸を処理したサンプルで活性型bZIP28が検出された。そのためサリチル酸が植物の小胞体ストレス応答を活性化すると考えられた。bZIP60の細胞質スプライシングに関わるRNAリガーゼの同定bZIP60の細胞質スプライシングにおける連結反応を触媒するRNAリガーゼの候補としてtRNAリガーゼAtRlg1に着目して関係を調べた。大腸菌を宿主として作製したIRE1組換えタンパク質とbZIP60 RNAを反応すると切断が見られた。次にIRE1が切断したbZIP60 RNAとAtRlg1組換えタンパク質を反応すると連結によって生じたRNAが確認された。つまり、試験管内においてAtRlg1はIRE1が切断したbZIP60を連結する活性をもっていた。さらに、植物体におけるAtRlg1の局在を細胞分画により調べると、細胞質スプライシングが起きると考えられる小胞体膜を含む膜画分からAtRlg1の一部が検出された。以上の結果からAtRlg1がbZIP60の細胞質スプライシングに関与する可能性が示唆された。

サリチル酸とシロイヌナズナの小胞体ストレス応答の関係および植物の小胞体ストレス応答における情報伝達経路の一つIRE1-bZIP60経路の細胞質スプライシングの連結反応に関与する未知のRNAリガーゼについて以下の研究をおこなった。サリチル酸と小胞体ストレス応答の関係の解明サリチル酸処理による小胞体シャペロンの転写レベルの誘導や小胞体ストレス応答関連転写因子bZIP60の活性化をこれまでに明らかにしていた。bZIP60と同様に小胞体ストレス応答関連転写因子bZIP28のサリチル酸による活性化について調べた。bZIP28特異的な抗体によるイムノブロット解析の結果、サリチル酸を処理したサンプルで活性型bZIP28が検出された。そのためサリチル酸が植物の小胞体ストレス応答を活性化すると考えられた。bZIP60の細胞質スプライシングに関わるRNAリガーゼの同定bZIP60の細胞質スプライシングにおける連結反応を触媒するRNAリガーゼの候補としてtRNAリガーゼAtRlg1に着目して関係を調べた。大腸菌を宿主として作製したIRE1組換えタンパク質とbZIP60 RNAを反応すると切断が見られた。次にIRE1が切断したbZIP60 RNAとAtRlg1組換えタンパク質を反応すると連結によって生じたRNAが確認された。つまり、試験管内においてAtRlg1はIRE1が切断したbZIP60を連結する活性をもっていた。さらに、植物体におけるAtRlg1の局在を細胞分画により調べると、細胞質スプライシングが起きると考えられる小胞体膜を含む膜画分からAtRlg1の一部が検出された。以上の結果からAtRlg1がbZIP60の細胞質スプライシングに関与する可能性が示唆された。